AB2.2

AB2.2 šūnu līnija ir plaši izmantota peļu embrionālo cilmes (ES) šūnu līnija, kas iegūta no 129S7 (pazīstama arī kā 129P2/OlaHsd) peļu celma. Tā ir bijusi nozīmīga gēnu mērķēšanas un transgēno peļu radīšanas procesā, jo tai ir liela spēja paplašināties in vitro un veikt ģenētiskās manipulācijas. AB2.2 šūnas ir pluripotentas, spēj veidot visus dzimumšūnu slāņus un ir bijušas noderīgas, lai radītu dzimumšūnas, kas atbilst dzimumlīnijai. Tomēr AB2.2, tāpat kā daudzām citām ES šūnu līnijām, kas tiek uzturētas ilgāku kultivēšanas laiku, ir tendētas uz hromosomu nestabilitāti, jo īpaši aneuploīdijām, kas saistītas ar 8. hromosomu.

AB2.2 un tās apakšlīniju citogenētiskā analīze ir atklājusi augstu hromosomu anomāliju biežumu, īpaši bieži sastopama mozaīka un tīra trisomija 8. Vienā pētījumā AB2.2 tika konstatēts mozaīkveida kariotips, kas ietvēra 8. un Y hromosomu pieaugumu, tostarp tādas konfigurācijas kā 42,XY,+Y,+Y,+8 / 41,XY,+Y / 40,XY. Tās apakšlīnijās tika konstatētas papildu kariotipiskas anomālijas, piemēram, dubultas trisomijas, kas ietver 8. un 11. hromosomu, un sarežģītas atvasinātās hromosomas, kas rodas no nelīdzsvarotām translokācijām, kas ietver 8. hromosomu. Šīs strukturālās un skaitliskās aberācijas ir saistītas ar samazinātu dzimumlīnijas transmisijas efektivitāti, un to klātbūtne sarežģī genotipa un fenotipa attiecību interpretāciju himēriskos dzīvniekos.

Ņemot vērā AB2.2 ģenētisko izcelsmi un uzņēmību pret hromosomu nestabilitāti, tā joprojām ir spēcīgs peļu ģenētikas instruments, taču tai nepieciešama rūpīga kvalitātes kontrole. Lai nodrošinātu hromosomu integritāti, kas nepieciešama drošai dzimumlīnijas transmisijai un precīzai fenotipiskai analīzei, pirms blastocistu ievadīšanas ieteicams veikt regulāru kariotipa skrīningu, tostarp G-bandingu un FISH.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu