AB2.2

Ląstelių linija AB2.2 yra plačiai naudojama pelių embrioninių kamieninių (ES) ląstelių linija, gauta iš 129S7 (taip pat žinoma kaip 129P2/OlaHsd) pelių padermės. Dėl didelio gebėjimo plėstis in vitro ir atlikti genetines manipuliacijas, ji atlieka svarbų vaidmenį genų tikslinėje atrankoje ir transgeninių pelių kūrime. AB2.2 ląstelės yra pliuripotentinės, gali būti naudojamos visuose gemaliniuose sluoksniuose ir yra labai svarbios gaminant gemalinės linijos reikalavimus atitinkančias chimeras. Tačiau, kaip ir daugelis kitų ES ląstelių linijų, palaikomų ilgesnį laiką, AB2.2 yra linkusios į chromosomų nestabilumą, ypač į aneuploidiją, susijusią su 8 chromosoma.

Atlikus AB2.2 ir jos sublinijų citogenetinę analizę, nustatyta, kad chromosomų anomalijų dažnumas yra didelis, ypač dažnos yra mozaikinė ir grynoji trisomija 8. Viename tyrime AB2.2 buvo nustatytas mozaikinis kariotipas, apimantis 8 ir Y chromosomų padidėjimą, įskaitant tokias konfigūracijas kaip 42,XY,+Y,+8 / 41,XY,+Y / 40,XY. Tarp jos sublinijų buvo nustatyta papildomų kariotipinių anomalijų, tokių kaip dvigubos trisomijos, apimančios 8 ir 11 chromosomas, ir sudėtingos išvestinės chromosomos, atsirandančios dėl nesubalansuotų translokacijų, apimančių 8 chromosomą. Šios struktūrinės ir skaitmeninės aberacijos yra susijusios su mažesniu gemalinės linijos perdavimo efektyvumu, o jų buvimas komplikuoja genotipo ir fenotipo santykių aiškinimą chimeriniuose gyvūnuose.

Atsižvelgiant į genetinį foną ir polinkį į chromosominį nestabilumą, AB2.2 išlieka galinga pelių genetikos priemonė, tačiau reikia kruopščios kokybės kontrolės. Prieš atliekant blastocistos injekciją, rekomenduojama atlikti įprastinę kariotipo patikrą, įskaitant G-bandingą ir FISH, kad būtų užtikrintas chromosomų vientisumas, būtinas patikimam giminės perdavimui ir tikslioms fenotipinėms analizėms.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime