AB2.2

AB2.2細胞株は、129S7（129P2/OlaHsdとしても知られる）マウス系統由来のマウス胚性幹（ES）細胞株として広く利用されている。AB2.2 細胞株は、in vitro での膨張と遺伝子操作が可能であることから、遺伝子ターゲティングやトランスジェニックマウス作製において重要な役割を果たしている。AB2.2細胞は多能性で、すべての生殖細胞層に寄与することができ、生殖細胞系列に適合したキメラの作製に役立ってきた。しかし、長期培養を続ける多くのES細胞株と同様、AB2.2細胞は染色体不安定性、特に8番染色体を含む異数性を起こしやすい。

AB2.2とそのサブラインの細胞遺伝学的解析から、染色体異常の頻度が高いことが明らかになっており、特にモザイク型と純粋なトリソミー8が多い。ある研究では、AB2.2は42,XY,+Y,+8/41,XY,+Y/40,XYのような構成を含む、8番とY番の染色体増加を伴うモザイク型核型を示した。また、8番と11番を含む二重トリソミーや、8番を含む不均衡転座による複雑な派生染色体などの核型異常も確認された。これらの構造的・数的異常は生殖細胞系列への伝達効率の低下と関連しており、これらの存在はキメラ動物における遺伝子型-表現型関係の解釈を複雑にしている。

AB2.2の遺伝的背景と染色体不安定性への感受性を考えると、AB2.2はマウス遺伝学における強力なツールであり続けるが、慎重な品質管理が必要である。信頼性の高い生殖細胞系列伝達と正確な表現型解析に必要な染色体の完全性を確保するために、胚盤胞注入を進める前に、G-バンディングとFISHの両方を含む定期的な核型スクリーニングを行うことが推奨される。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。