AB2.2

Клітинна лінія AB2.2 - це широко використовувана лінія ембріональних стовбурових клітин (ЕС) миші, отримана зі штаму 129S7 (також відомого як 129P2/OlaHsd). Вона відіграє важливу роль у генному таргетінгу та створенні трансгенних мишей завдяки своїй здатності до експансії in vitro та генетичних маніпуляцій. Клітини AB2.2 є плюрипотентними, здатними давати початок усім зародковим шарам і відіграли важливу роль у створенні компетентних до зародкових ліній химер. Однак, як і багато інших клітинних ліній ES, що підтримуються протягом тривалих періодів культивування, AB2.2 схильні до хромосомної нестабільності, особливо до анеуплоїдії за участю хромосоми 8.

Цитогенетичний аналіз AB2.2 та її субліній виявив високу частоту хромосомних аномалій, особливо часто зустрічається мозаїчна та чиста трисомія 8. В одному дослідженні AB2.2 демонстрував мозаїчний каріотип, що включає збільшення хромосом 8 і Y, включаючи такі конфігурації, як 42,XY,+Y,+8 / 41,XY,+Y / 40,XY. Серед його підліній були виявлені додаткові каріотипічні аномалії, такі як подвійні трисомії за участю хромосом 8 і 11, а також складні похідні хромосоми, що виникають в результаті незбалансованих транслокацій за участю хромосоми 8. Ці структурні та числові аберації пов'язані зі зниженням ефективності передачі зародкової лінії, і їх наявність ускладнює інтерпретацію генотип-фенотипових взаємозв'язків у химерних тварин.

Враховуючи його генетичне походження і схильність до хромосомної нестабільності, AB2.2 залишається потужним інструментом в генетиці мишей, але він вимагає ретельного контролю якості. Перед ін'єкцією бластоцисти рекомендується провести рутинний скринінг каріотипу, включаючи G-бендінг і FISH, щоб забезпечити хромосомну цілісність, необхідну для надійної передачі зародкової лінії і точного фенотипічного аналізу.

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>