Skip to content
AB2.2
Tissue
בלסטוציסט

Documents

AB2.2

Cell line · Product number 305738

The AB2.2 cell line is a widely utilized murine embryonic stem (ES) cell line derived from the 129S7 (also known as 129P2/OlaHsd) mouse strain. It has pla...

US$650.00excl. tax and shipping
Low stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

קו התאים AB2.2 הוא קו תאי גזע עובריים (ES) של עכברים הנמצא בשימוש נרחב, שמקורו בזן העכברים 129S7 (הידוע גם כ-129P2/OlaHsd). הוא מילא תפקיד בולט במיקוד גנים וביצירת עכברים מהונדסים גנטית, בזכות יכולתו המרשימה להתרבות במבחנה ולעבור מניפולציות גנטיות. תאי AB2.2 הם תאים פלוריפוטנטיים, המסוגלים לתרום לכל שכבות הגרעין, והם שימשו לייצור כימרות בעלות יכולת רבייה. עם זאת, כמו קווי תאים ES רבים המוחזקים לאורך תקופות תרבית ממושכות, AB2.2 נוטה לחוסר יציבות כרומוזומלית, במיוחד לאנופלואידיות הכרוכה בכרומוזום 8.

ניתוח ציטוגנטי של AB2.2 ושל תת-הקווים שלו גילה שכיחות גבוהה של חריגות כרומוזומליות, כאשר טריזומיה 8 מוזאיקית וטהורה נפוצות במיוחד. במחקר אחד, AB2.2 הציג קריוטיפ מוזאיקי הכרוך ברווח כרומוזומים 8 ו-Y, כולל תצורות כגון 42,XY,+Y,+8 / 41,XY,+Y / 40,XY. בקרב תת-הקווים שלו זוהו אנומליות קריוטיפיות נוספות, כגון טריזומיות כפולות הכרומות בכרומוזומים 8 ו-11, וכרומוזומים נגזרים מורכבים הנובעים מהעברות לא מאוזנות הכרוכות בכרומוזום 8. סטיות מבניות ומספריות אלה קשורות לירידה ביעילות העברת הגרעין, ונוכחותן מסבכת את הפרשנות של יחסי גנוטיפ-פנוטיפ בבעלי חיים כימריים.

בהתחשב ברקע הגנטי שלו ובנטייתו לחוסר יציבות כרומוזומלית, AB2.2 נותר כלי רב עוצמה בגנטיקה של עכברים, אך הוא דורש בקרת איכות קפדנית. מומלץ לבצע בדיקת קריוטיפ שגרתית – הכוללת הן G-banding והן FISH – לפני ביצוע הזרקת בלסטוציסט, כדי להבטיח את שלמות הכרומוזומים הנדרשת להעברה אמינה של קו הגרמי ולניתוח פנוטיפי מדויק.

Tissue
בלסטוציסט
Applications
מחקר בתאי גזע

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
תאי גזע עובריים

04Identifiers

Citation
AB2.2 (מספר קטלוגי Cytion 305738)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_C261

05Handling and culture

Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Seeding density
3 עד 5 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Donor age
עובר