AB2.2

La línea celular AB2.2 es una línea de células madre embrionarias (ES) murinas ampliamente utilizada, derivada de la cepa de ratón 129S7 (también conocida como 129P2/OlaHsd). Ha desempeñado un papel destacado en la modificación génica y la generación de ratones transgénicos debido a su gran capacidad de expansión in vitro y manipulación genética. Las células AB2.2 son pluripotentes, capaces de dar lugar a todas las capas germinales, y han sido fundamentales en la producción de quimeras con competencia germinal. Sin embargo, al igual que muchas líneas celulares ES mantenidas durante largos períodos de cultivo, la AB2.2 es propensa a la inestabilidad cromosómica, especialmente a la aneuploidía que afecta al cromosoma 8.

El análisis citogenético de AB2.2 y sus sublíneas ha revelado una alta frecuencia de anomalías cromosómicas, siendo particularmente comunes la trisomía 8 mosaica y la trisomía 8 pura. En un estudio, la línea AB2.2 presentó un cariotipo mosaico que implicaba ganancias de los cromosomas 8 e Y, incluyendo configuraciones tales como 42,XY,+Y,+8 / 41,XY,+Y / 40,XY. Entre sus sublíneas, se identificaron anomalías cariotípicas adicionales, como trisomías dobles que involucran los cromosomas 8 y 11, y cromosomas derivados complejos que surgen de translocaciones desequilibradas que involucran el cromosoma 8. Estas aberraciones estructurales y numéricas están asociadas con una menor eficiencia de transmisión en la línea germinal, y su presencia complica la interpretación de las relaciones genotipo-fenotipo en animales quiméricos.

Dado su trasfondo genético y su susceptibilidad a la inestabilidad cromosómica, la línea AB2.2 sigue siendo una herramienta poderosa en la genética del ratón, pero requiere un control de calidad minucioso. Se recomienda realizar un cribado rutinario del cariotipo —que incluya tanto el tinción con bandas G como la técnica FISH— antes de proceder a la inyección en blastocistos, a fin de garantizar la integridad cromosómica necesaria para una transmisión germinal confiable y análisis fenotípicos precisos.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.