AB2.2

Die AB2.2-Zelllinie ist eine weit verbreitete embryonale Stammzelllinie (ES-Zelllinie) der Maus, die aus dem 129S7-Mausstamm (auch bekannt als 129P2/OlaHsd) stammt. Aufgrund ihrer robusten Fähigkeit zur In-vitro-Expansion und genetischen Manipulation hat sie eine herausragende Rolle beim Gen-Targeting und bei der Erzeugung transgener Mäuse gespielt. AB2.2-Zellen sind pluripotent und in der Lage, zu allen Keimschichten beizutragen, und haben bei der Erzeugung keimbahnkompetenter Chimären eine wichtige Rolle gespielt. Wie viele ES-Zelllinien, die über einen längeren Zeitraum kultiviert werden, neigt AB2.2 jedoch zu chromosomaler Instabilität, insbesondere zu Aneuploidie mit Chromosom 8.

Die zytogenetische Analyse von AB2.2 und seinen Unterlinien hat eine hohe Häufigkeit von Chromosomenanomalien ergeben, wobei Mosaik- und reine Trisomie 8 besonders häufig sind. In einer Studie zeigte AB2.2 einen Mosaik-Karyotyp mit Zuwächsen der Chromosomen 8 und Y, einschließlich Konfigurationen wie 42,XY,+Y,+8 / 41,XY,+Y / 40,XY. In den Unterlinien wurden zusätzliche karyotypische Anomalien festgestellt, wie z. B. doppelte Trisomien, an denen die Chromosomen 8 und 11 beteiligt sind, und komplexe derivative Chromosomen, die aus unausgewogenen Translokationen des Chromosoms 8 hervorgehen. Diese strukturellen und numerischen Aberrationen sind mit einer geringeren Effizienz der Keimbahnübertragung verbunden, und ihr Vorhandensein erschwert die Interpretation der Genotyp-Phänotyp-Beziehungen bei chimären Tieren.

Angesichts des genetischen Hintergrunds und der Anfälligkeit für chromosomale Instabilität bleibt AB2.2 ein leistungsfähiges Instrument in der Mausgenetik, das jedoch eine sorgfältige Qualitätskontrolle erfordert. Ein routinemäßiges Karyotyp-Screening - einschließlich G-Banding und FISH - wird empfohlen, bevor mit der Blastozysteninjektion begonnen wird, um die chromosomale Integrität sicherzustellen, die für eine zuverlässige Keimbahnübertragung und genaue phänotypische Analysen erforderlich ist.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung