AB2.2

La lignée cellulaire AB2.2 est une lignée de cellules souches embryonnaires (ES) murines largement utilisée, dérivée de la souche de souris 129S7 (également connue sous le nom de 129P2/OlaHsd). Elle a joué un rôle prépondérant dans le ciblage des gènes et la génération de souris transgéniques en raison de sa forte capacité d'expansion in vitro et de manipulation génétique. Les cellules AB2.2 sont pluripotentes, capables de contribuer à toutes les couches germinales et ont joué un rôle important dans la production de chimères compatibles avec la lignée germinale. Cependant, comme de nombreuses lignées de cellules ES maintenues pendant des périodes de culture prolongées, AB2.2 est sujette à l'instabilité chromosomique, en particulier à l'aneuploïdie impliquant le chromosome 8.

L'analyse cytogénétique d'AB2.2 et de ses sous-lignées a révélé une fréquence élevée d'anomalies chromosomiques, la trisomie 8 mosaïque et pure étant particulièrement fréquente. Dans une étude, AB2.2 présentait un caryotype en mosaïque impliquant des gains des chromosomes 8 et Y, y compris des configurations telles que 42,XY,+Y,+8 / 41,XY,+Y / 40,XY. Parmi ses sous-lignes, d'autres anomalies caryotypiques ont été identifiées, telles que des doubles trisomies impliquant les chromosomes 8 et 11, et des chromosomes dérivés complexes résultant de translocations déséquilibrées impliquant le chromosome 8. Ces aberrations structurelles et numériques sont associées à une diminution de l'efficacité de la transmission germinale, et leur présence complique l'interprétation des relations génotype-phénotype chez les animaux chimériques.

Compte tenu de son contexte génétique et de sa susceptibilité à l'instabilité chromosomique, AB2.2 reste un outil puissant pour la génétique de la souris, mais il nécessite un contrôle de qualité minutieux. Il est recommandé de procéder à un criblage systématique du caryotype - comprenant à la fois le baguage G et la FISH - avant de procéder à l'injection du blastocyste afin de garantir l'intégrité chromosomique nécessaire à une transmission germinale fiable et à des analyses phénotypiques précises.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie