AB2.2

Az AB2.2 sejtvonal egy széles körben használt, a 129S7 (más néven 129P2/OlaHsd) egértörzsből származó egér embrionális őssejt (ES) sejtvonal. Kiemelkedő szerepet játszott a géncélzásban és a transzgenikus egérgenerálásban az in vitro expanzióra és genetikai manipulációra való robusztus képessége miatt. Az AB2.2 sejtek pluripotensek, képesek valamennyi csíraréteghez hozzájárulni, és fontos szerepet játszottak a csírakompetens kimérák előállításában. Azonban, mint sok ES-sejtvonal, amelyet hosszú tenyésztési időszakon keresztül tartanak fenn, az AB2.2 is hajlamos a kromoszóma-instabilitásra, különösen a 8-as kromoszómát érintő aneuploidiára.

Az AB2.2 és alvonalainak citogenetikai elemzése a kromoszóma-rendellenességek magas gyakoriságát mutatta ki, különösen gyakoriak a mozaikos és a tiszta 8-as triszómia. Egy vizsgálatban az AB2.2 mozaikos kariotípust mutatott, amely a 8-as és Y kromoszómák nyereségét tartalmazta, beleértve az olyan konfigurációkat, mint 42,XY,+Y,+8 / 41,XY,+Y / 40,XY. Alvonalai között további kariotípusos anomáliákat azonosítottak, például a 8-as és 11-es kromoszómákat érintő kettős triszómiákat, valamint a 8-as kromoszómát érintő kiegyensúlyozatlan transzlokációkból származó komplex származékos kromoszómákat. Ezek a strukturális és numerikus aberrációk csökkent csíravonalbeli átviteli hatékonysággal járnak, és jelenlétük megnehezíti a genotípus-fenotípus kapcsolatok értelmezését a kiméra állatokban.

Tekintettel a genetikai háttérre és a kromoszóma-instabilitásra való fogékonyságra, az AB2.2 továbbra is hatékony eszköz az egérgenetikában, de gondos minőségellenőrzést igényel. A megbízható csíravonalbeli átvitelhez és a pontos fenotípusos elemzésekhez szükséges kromoszómaintegritás biztosítása érdekében a blasztociszta befecskendezés megkezdése előtt rutinszerű kariotípus-szűrés - beleértve a G-csíkozást és a FISH-t is - ajánlott.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban