AB2.2

Celična linija AB2.2 je pogosto uporabljena linija mišjih embrionalnih matičnih celic (ES), pridobljena iz seva 129S7 (znanega tudi kot 129P2/OlaHsd). Zaradi svoje velike zmogljivosti za in vitro širjenje in genetsko manipulacijo je imela pomembno vlogo pri ciljnem usmerjanju genov in ustvarjanju transgenih miši. Celice AB2.2 so pluripotentne, sposobne prispevati k vsem zarodnim plastem in so bile ključne pri ustvarjanju zarodno kompetentnih himer. Vendar je AB2.2, tako kot številne celične linije ES, ki se vzdržujejo dlje časa, nagnjena k kromosomski nestabilnosti, zlasti k anevploidiji, ki vključuje kromosom 8.

Citogenetska analiza AB2.2 in njenih podlinij je pokazala visoko pogostost kromosomskih nepravilnosti, pri čemer sta zlasti pogosti mozaik in čista trisomija 8. V eni od študij je bil pri AB2.2 ugotovljen mozaični kariotip, ki je vključeval povečanje kromosomov 8 in Y, vključno s konfiguracijami, kot so 42,XY,+Y,+8 / 41,XY,+Y / 40,XY. Med njegovimi podlinijami so bile ugotovljene dodatne kariotipske anomalije, kot so dvojna trisomija, ki vključuje kromosoma 8 in 11, ter kompleksni derivativni kromosomi, ki nastanejo zaradi neuravnoteženih translokacij, ki vključujejo kromosom 8. Te strukturne in številčne aberacije so povezane z zmanjšano učinkovitostjo prenosa po zarodni liniji, njihova prisotnost pa otežuje razlago razmerij med genotipom in fenotipom pri himernih živalih.

Zaradi genetskega ozadja in dovzetnosti za kromosomsko nestabilnost ostaja AB2.2 močno orodje v mišji genetiki, vendar zahteva skrben nadzor kakovosti. Rutinski pregled kariotipa - vključno z G-bandingom in FISH - je priporočljiv pred začetkom injiciranja blastociste, da se zagotovi kromosomska integriteta, potrebna za zanesljiv prenos v zarodno linijo in natančne fenotipske analize.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo