AB2.2

خط الخلايا AB2.2 هو خط الخلايا الجذعية الجنينية للفئران (ES) المستخدم على نطاق واسع والمشتق من سلالة الفأر 129S7 (المعروف أيضاً باسم 129P2/OlaHsd). وقد لعب دورًا بارزًا في استهداف الجينات وتوليد الفئران المعدلة وراثيًا نظرًا لقدرته القوية على التوسع في المختبر والتلاعب الجيني. تتميز خلايا AB2.2 بأنها متعددة القدرات، وقادرة على المساهمة في جميع الطبقات الجرثومية، وقد لعبت دوراً أساسياً في إنتاج خيمرات قادرة على إنتاج خلايا قادرة على إنتاج الجينات. ومع ذلك، مثل العديد من سلالات الخلايا الوراثية التي يتم الاحتفاظ بها على مدى فترات استزراع طويلة، فإن AB2.2 عرضة لعدم الاستقرار الصبغي، وخاصةً اختلال الصيغة الصبغية الصبغية التي تشمل الكروموسوم 8.

وقد كشف التحليل الخلوي الوراثي الخلوي ل AB2.2 وخطوطه الفرعية عن وجود تواتر عالٍ من التشوهات الصبغية، مع شيوع الفسيفساء والتثلث الصبغي 8 النقي بشكل خاص. في إحدى الدراسات، أظهر AB2.2 نمطًا نوويًا فسيفسائيًا يتضمن مكاسب في الكروموسومات 8 و Y، بما في ذلك تكوينات مثل 42،XY،+Y،+Y،+8/41،XY،+Y،+Y/40،XY. ومن بين خطوطها الفرعية، تم تحديد حالات شذوذ إضافية في النمط النووي، مثل التثلث الصبغي المزدوج الذي يشمل الكروموسومين 8 و11، وكروموسومات مشتقة معقدة ناشئة عن عمليات انتقال غير متوازنة تشمل الكروموسوم 8. وترتبط هذه الانحرافات الهيكلية والعددية بانخفاض كفاءة انتقال السلالة الجرثومية، ووجودها يعقد تفسير العلاقات بين النمط الجيني والنمط الوراثي في الحيوانات الكيمرية.

ونظراً لخلفيتها الجينية وقابليتها لعدم استقرار الكروموسومات، تظل AB2.2 أداة قوية في علم الوراثة لدى الفئران، ولكنها تتطلب مراقبة دقيقة للجودة. يوصى بإجراء فحص روتيني للنمط النووي - بما في ذلك كل من التوسيع الجيني و FISH - قبل الشروع في حقن الكيسة الأريمية لضمان سلامة الكروموسومات اللازمة لنقل موثوق به للسلالة الجرثومية وتحليلات دقيقة للنمط الظاهري.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان