AB2.2

AB2.2 rakuliin on laialdaselt kasutatav hiirte embrüonaalse tüve (ES) rakuliin, mis on saadud 129S7 (tuntud ka kui 129P2/OlaHsd) hiirtüvest. See on mänginud silmapaistvat rolli geenide sihitamise ja transgeensete hiirte genereerimisel tänu oma tugevale võimele in vitro laienemiseks ja geneetiliseks manipulatsiooniks. AB2.2 rakud on pluripotentsed, võimelised panustama kõikidesse sugukihti ja neil on olnud oluline roll sugukonna-kompetentsete kimääride tootmisel. Kuid nagu paljud ES rakuliinid, mida hoitakse pikema aja jooksul, on ka AB2.2 kalduvus kromosoomide ebastabiilsusele, eriti aneuploidsusele, mis hõlmab kromosoomi 8.

AB2.2 ja selle alamliinide tsütogeneetiline analüüs on näidanud kromosoomianomaaliate suurt sagedust, kusjuures eriti levinud on mosaiikne ja puhas trisoomia 8. Ühes uuringus ilmnes AB2.2 mosaiikne karyotüüp, mis hõlmas kromosoomide 8 ja Y suurenemist, sealhulgas selliseid konfiguratsioone nagu 42,XY,+Y,+8 / 41,XY,+Y / 40,XY. Selle alamliinide hulgas tuvastati täiendavaid karyotüübi anomaaliaid, nagu topelt trisoomia, mis hõlmasid kromosoomi 8 ja 11, ning komplekssed tuletatud kromosoomid, mis tekkisid tasakaalustamata translokatsioonidest, mis hõlmasid kromosoomi 8. Need struktuurilised ja numbrilised kõrvalekalded on seotud vähenenud sugupoolte edasikandumise tõhususega ning nende esinemine raskendab genotüübi ja fenotüübi vaheliste suhete tõlgendamist kimeerilistel loomadel.

Arvestades geneetilist tausta ja vastuvõtlikkust kromosoomide ebastabiilsusele, on AB2.2 endiselt võimas vahend hiirte geneetikas, kuid see nõuab hoolikat kvaliteedikontrolli. Enne blastotsüsti süstimist on soovitatav teha rutiinne karyotüübi sõelumine, mis hõlmab nii G-bandingi kui ka FISH-meetodit, et tagada kromosoomide terviklikkus, mis on vajalik usaldusväärseks suguravi ülekandmiseks ja täpseks fenotüübi analüüsiks.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest