AB2.2

Linia komórkowa AB2.2 jest szeroko stosowaną mysią embrionalną linią komórkową (ES) pochodzącą ze szczepu myszy 129S7 (znanego również jako 129P2/OlaHsd). Odegrała ona znaczącą rolę w ukierunkowaniu genów i generowaniu transgenicznych myszy ze względu na jej solidną zdolność do ekspansji in vitro i manipulacji genetycznych. Komórki AB2.2 są pluripotencjalne, zdolne do współtworzenia wszystkich warstw zarodkowych i odegrały kluczową rolę w produkcji zarodkowych chimer. Jednakże, podobnie jak wiele linii komórek ES utrzymywanych przez dłuższy okres hodowli, AB2.2 są podatne na niestabilność chromosomalną, zwłaszcza aneuploidię obejmującą chromosom 8.

Analiza cytogenetyczna AB2.2 i jego podlinii ujawniła wysoką częstotliwość nieprawidłowości chromosomalnych, przy czym mozaika i czysta trisomia 8 są szczególnie powszechne. W jednym z badań AB2.2 wykazywał kariotyp mozaikowy obejmujący wzmocnienia chromosomów 8 i Y, w tym konfiguracje takie jak 42,XY,+Y,+8 / 41,XY,+Y / 40,XY. Wśród jego podlinii zidentyfikowano dodatkowe anomalie kariotypowe, takie jak podwójne trisomie obejmujące chromosomy 8 i 11 oraz złożone chromosomy pochodne wynikające z niezrównoważonych translokacji obejmujących chromosom 8. Te strukturalne i liczbowe aberracje są związane ze zmniejszoną wydajnością transmisji w linii zarodkowej, a ich obecność komplikuje interpretację relacji genotyp-fenotyp u zwierząt chimerycznych.

Biorąc pod uwagę tło genetyczne i podatność na niestabilność chromosomalną, AB2.2 pozostaje potężnym narzędziem w genetyce myszy, ale wymaga starannej kontroli jakości. Rutynowe badanie kariotypu - w tym zarówno G-banding, jak i FISH - jest zalecane przed przystąpieniem do wstrzyknięcia blastocysty w celu zapewnienia integralności chromosomalnej niezbędnej do niezawodnej transmisji linii zarodkowej i dokładnych analiz fenotypowych.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym