BV2

Les cellules BV2 constituent une lignée cellulaire microgliale dérivée de la souche murine C57BL/6, une souche de souris de laboratoire largement utilisée pour les expériences sur les animaux. Ces cellules microgliales ont été immortalisées à l’aide du rétrovirus J2, qui porte les oncogènes v-raf et v-myc, ce qui a permis d’obtenir une lignée cellulaire stable présentant des caractéristiques uniques. Les cellules BV2 expriment les oncogènes v-myc (nucléaires) et v-RAF (cytoplasmiques), ainsi que l’antigène env gp70 à leur surface, ce qui contribue à leur rôle dans les réponses immunitaires et l’inflammation au sein du cerveau. L’un des principaux avantages des cellules BV2 réside dans leur capacité à conserver les caractéristiques morphologiques et fonctionnelles des microglies primaires, les cellules immunitaires résidentes du système nerveux central, ce qui en fait un modèle idéal pour l’étude de la neurodégénérescence et de l’inflammation cérébrale.

Le rôle des microglies dans la neurodégénérescence, la toxicologie et l’immunité, en particulier dans des affections telles que la maladie d’Alzheimer, constitue un domaine en pleine expansion de la recherche biomédicale. Les études traditionnelles s’appuient souvent sur des cultures de microglies primaires et des préparations cellulaires en continu. L’utilisation d’une lignée cellulaire de type microglial, telle que les cellules BV2, offre une alternative prometteuse en fournissant une source continue et reproductible de microglies. Les cellules BV2, en raison de l’expression de v-raf/v-myc, présentent un métabolisme et une croissance accrus, ce qui les rend idéales pour la recherche sur l’activation microgliale et l’inflammation. Leur expression d’oncogènes et d’antigènes spécifiques est similaire à celle des macrophages, ce qui les rend précieuses pour l’étude des réponses immunitaires et des mécanismes pathologiques.

Une réévaluation récente des cellules de microglies BV2 dérivées de souris a examiné leur aptitude à remplacer les microglies primaires (MP). La réponse des cellules BV2 au lipopolysaccharide a été comparée à celle des microglies dans des conditions in vitro et in vivo; toutefois, la régulation à la hausse des gènes s’est avérée en moyenne légèrement moins prononcée. Les cellules BV2 ont montré une régulation normale de l’oxyde nitrique et une réponse fonctionnelle à l’IFN-gamma, paramètres essentiels pour leur interaction avec les cellules T, les neurones et d’autres cellules gliales telles que les astrocytes. On a également constaté que les cellules BV2 stimulaient efficacement d’autres cellules gliales, entraînant la production d’interleukine-6 (IL-6) dans les astrocytes.

Cette interaction entre les astrocytes et les microglies est cruciale pour comprendre les interactions cellulaires complexes et la réponse inflammatoire dans le cerveau, en particulier dans le contexte de maladies neurodégénératives comme la maladie d’Alzheimer, où des protéines telles que NAPoe31 et NAPoe41, ainsi que des voies comme la réponse de sursaut et l’apoptose, jouent des rôles importants.

Les cellules BV2 constituent un outil robuste et fiable pour les chercheurs en biologie des microglies. Leur expression des produits des oncogènes v-raf/v-myc leur permet de conserver les caractéristiques clés des microglies et des macrophages. Les cellules BV2 se sont révélées être un substitut valable aux microglies primaires dans divers contextes expérimentaux, facilitant ainsi la recherche sur la neurodégénérescence, la toxicologie, l’immunité et les interactions intercellulaires.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.