Skip to content
BV2
Tissue
Não
Synonyms
BV-2

Documents

BV2

Cell line · Product number 305156

BV2 cells are a type of microglial cell line derived from C57BL/6 murine, a widely used laboratory mouse strain for animal experiments. These microglial c...

€650.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Tế bào BV2 là một dòng tế bào vi mô được phân lập từ chuột C57BL/6, một chủng chuột thí nghiệm phổ biến được sử dụng rộng rãi trong các thí nghiệm trên động vật. Các tế bào vi mô này đã được bất tử hóa bằng retrovirus J2, mang các gen ung thư v-raf và v-myc, tạo ra một dòng tế bào ổn định với các đặc tính độc đáo. Tế bào BV2 biểu hiện gen ung thư v-myc trong nhân và gen ung thư v-RAF trong tế bào chất, cùng với kháng nguyên env gp70 trên bề mặt, góp phần vào vai trò của chúng trong phản ứng miễn dịch và viêm nhiễm trong não. Một trong những ưu điểm quan trọng của tế bào BV2 là khả năng duy trì các đặc tính hình thái và chức năng của tế bào microglia nguyên phát, là các tế bào miễn dịch cư trú trong hệ thần kinh trung ương, khiến chúng trở thành mô hình lý tưởng để nghiên cứu thoái hóa thần kinh và viêm não.

Vai trò của microglia trong thoái hóa thần kinh, độc học và miễn dịch, đặc biệt trong các bệnh như Alzheimer, là một lĩnh vực nghiên cứu y sinh đang phát triển mạnh mẽ. Các nghiên cứu truyền thống thường dựa vào nuôi cấy microglia nguyên phát và các chế phẩm tế bào liên tục. Sử dụng dòng tế bào tương tự microglia, như tế bào BV2, cung cấp một giải pháp thay thế hứa hẹn bằng cách cung cấp nguồn tế bào microglia liên tục và có thể tái tạo. Tế bào BV2, do biểu hiện v-raf/v-myc, có chuyển hóa và tăng trưởng tăng cường, lý tưởng cho nghiên cứu về kích hoạt microglia và viêm. Biểu hiện của các gen ung thư và kháng nguyên cụ thể của chúng tương tự như đại thực bào, khiến chúng trở nên quý giá trong việc nghiên cứu phản ứng miễn dịch và cơ chế bệnh lý.

Một đánh giá gần đây về tế bào microglia BV2 của chuột đã xem xét tính phù hợp của chúng như một thay thế cho tế bào microglia nguyên phát (PM). Phản ứng của tế bào BV2 đối với lipopolysaccharide được so sánh với phản ứng của tế bào microglia trong cả môi trường in vitro và in vivo, tuy nhiên, sự tăng biểu hiện gen trung bình ít rõ rệt hơn. Các tế bào BV2 thể hiện điều hòa bình thường của oxit nitric và phản ứng chức năng với IFN-gamma, các thông số quan trọng cho tương tác của chúng với tế bào T, neuron và các tế bào glial khác như tế bào sao. Các tế bào BV2 cũng được phát hiện là kích thích hiệu quả các tế bào glial khác, dẫn đến sản xuất interleukin-6 (IL-6) trong tế bào sao.

Sự tương tác giữa tế bào astrocytes và microglia là yếu tố quan trọng để hiểu các tương tác tế bào phức tạp và phản ứng viêm trong não, đặc biệt trong bối cảnh các bệnh thoái hóa thần kinh như Alzheimer, nơi các protein như NAPoe31 và NAPoe41, cũng như các con đường như phản ứng giật mình và apoptosis, đóng vai trò quan trọng.

Tế bào BV2 cung cấp một công cụ mạnh mẽ và đáng tin cậy cho các nhà nghiên cứu trong lĩnh vực sinh học microglia. Việc biểu hiện các sản phẩm gen ung thư v-raf/v-myc cho phép chúng duy trì các đặc điểm chính của microglia và đại thực bào. Tế bào BV2 đã chứng minh là một thay thế hợp lệ cho microglia nguyên phát trong nhiều thiết lập thí nghiệm, hỗ trợ nghiên cứu về thoái hóa thần kinh, độc tính, miễn dịch và tương tác tế bào-tế bào.

Tissue
Não
Synonyms
  • BV-2

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Hình thái học của tế bào vi mô

04Identifiers

Citation
BV2 (Mã sản phẩm Cytion 305156)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0182

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, chứa: 2,0 mM glutamine ổn định, chứa: 2,0 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Thu thập các tế bào treo lơ lửng vào ống 15 ml và nhẹ nhàng rửa các tế bào bám dính bằng PBS không chứa canxi và magiê (sử dụng 3-5 ml cho bình T25 và 5-10 ml cho bình T75). Áp dụng Accutase (1-2 ml cho bình T25, 2,5 ml cho bình T75) đảm bảo phủ đều lớp tế bào. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 10 phút. Sau khi ủ, trộn và ly tâm cả tế bào treo lơ lửng và tế bào bám dính. Sau khi ly tâm, nhẹ nhàng hòa tan lại khối tế bào và chuyển hỗn hợp tế bào vào bình mới chứa môi trường tươi.
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

07Donor

Breed / subspecies
C57BL/6
Donor age
1 tuần