BV2
Cell line · Product number 305156
BV2 cells are a type of microglial cell line derived from C57BL/6 murine, a widely used laboratory mouse strain for animal experiments. These microglial c...
Customization / Recommendations
- BV2Cell line€650.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
เซลล์ BV2 เป็นเซลล์ไมโครเกลียลชนิดหนึ่งที่สกัดจากสายพันธุ์หนู C57BL/6 ซึ่งเป็นสายพันธุ์หนูทดลองที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในงานวิจัยทางสัตว์ทดลอง เซลล์ไมโครเกลียลเหล่านี้ถูกทำให้เป็นอมตะด้วยไวรัส J2 retrovirus ซึ่งนำยีน v-raf และ v-myc ที่เป็นออนโคจีนเข้าไป ส่งผลให้เกิดสายเซลล์ที่มีความคงตัวและมีลักษณะเฉพาะตัวเซลล์ BV2 แสดงออกของยีนก่อมะเร็ง v-myc ในนิวเคลียสและ v-RAF ในไซโตพลาซึม พร้อมกับแอนติเจน env gp70 บนพื้นผิว ซึ่งมีส่วนในการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันและการอักเสบภายในสมอง หนึ่งในข้อได้เปรียบที่สำคัญของเซลล์ BV2 คือความสามารถในการคงลักษณะทางสัณฐานวิทยาและหน้าที่ของไมโครเกลียปฐมภูมิ ซึ่งเป็นเซลล์ภูมิคุ้มกันประจำถิ่นในระบบประสาทส่วนกลาง ทำให้เป็นแบบจำลองที่เหมาะสมสำหรับการศึกษาการเสื่อมของระบบประสาทและการอักเสบในสมอง
บทบาทของไมโครเกลียในกระบวนการเสื่อมของระบบประสาท, พิษวิทยา, และภูมิคุ้มกัน, โดยเฉพาะในภาวะเช่นโรคอัลไซเมอร์, เป็นสาขาที่กำลังเติบโตอย่างต่อเนื่องในการวิจัยทางชีวการแพทย์. การศึกษาแบบดั้งเดิมมักพึ่งพาการเพาะเลี้ยงไมโครเกลียชนิดแรกเริ่มและการเตรียมเซลล์อย่างต่อเนื่อง.การใช้เซลล์ไลน์ที่มีลักษณะคล้ายไมโครเกลีย เช่น เซลล์ BV2 เป็นทางเลือกที่มีศักยภาพเนื่องจากให้แหล่งไมโครเกลียที่ต่อเนื่องและสามารถทำซ้ำได้ เซลล์ BV2 เนื่องจากการแสดงออกของ v-raf/v-myc แสดงให้เห็นถึงการเผาผลาญและการเจริญเติบโตที่เพิ่มขึ้น ซึ่งเหมาะสำหรับการวิจัยเกี่ยวกับการกระตุ้นไมโครเกลียและการอักเสบ การแสดงออกของยีนก่อมะเร็งและแอนติเจนเฉพาะของพวกมันคล้ายกับแมคโครฟาจ ทำให้มีคุณค่าในการศึกษาการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันและกลไกของโรค
การประเมินใหม่เมื่อเร็ว ๆ นี้ของเซลล์ไมโครเกลีย BV2 ในหนูได้ตรวจสอบความเหมาะสมในการใช้เป็นทางเลือกแทนไมโครเกลียปฐมภูมิ (PM) การตอบสนองของเซลล์ BV2 ต่อลิโพโพลีแซ็กคาไรด์ถูกเปรียบเทียบกับไมโครเกลียทั้งในสภาพแวดล้อมในหลอดทดลองและในร่างกาย อย่างไรก็ตาม การเพิ่มขึ้นของยีนมีแนวโน้มน้อยกว่าเล็กน้อยโดยเฉลี่ยเซลล์ BV2 แสดงการควบคุมปกติของไนตริกออกไซด์และการตอบสนองต่อการทำงานของ IFN-gamma ซึ่งเป็นพารามิเตอร์สำคัญสำหรับการมีปฏิสัมพันธ์กับเซลล์ T, เซลล์ประสาท และเซลล์เกลียอื่น ๆ เช่น แอสโทรไซต์ นอกจากนี้ยังพบว่าเซลล์ BV2 สามารถกระตุ้นเซลล์เกลียอื่น ๆ ได้อย่างมีประสิทธิภาพ ส่งผลให้เกิดการผลิตอินเตอร์ลิวคิน-6 (IL-6) ในแอสโทรไซต์
ปฏิสัมพันธ์ระหว่างแอสโทรไซต์และไมโครเกลียมีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการทำความเข้าใจปฏิสัมพันธ์ที่ซับซ้อนระหว่างเซลล์และการตอบสนองต่อการอักเสบในสมอง โดยเฉพาะอย่างยิ่งในบริบทของโรคความเสื่อมของระบบประสาท เช่น โรคอัลไซเมอร์ ซึ่งโปรตีนอย่าง NAPoe31 และ NAPoe41 รวมถึงเส้นทางต่างๆ เช่น การตอบสนองต่อความตกใจและการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส มีบทบาทสำคัญ
เซลล์ BV2 เป็นเครื่องมือที่แข็งแกร่งและเชื่อถือได้สำหรับนักวิจัยในด้านชีววิทยาของไมโครเกลีย การแสดงออกของผลิตภัณฑ์ยีน v-raf/v-myc ทำให้เซลล์เหล่านี้สามารถคงลักษณะสำคัญของไมโครเกลียและแมคโครฟาจไว้ได้ เซลล์ BV2 ได้รับการพิสูจน์แล้วว่าเป็นตัวแทนที่เหมาะสมสำหรับไมโครเกลียปฐมภูมิในสภาพแวดล้อมการทดลองที่หลากหลาย ช่วยอำนวยความสะดวกในการวิจัยเกี่ยวกับการเสื่อมของระบบประสาท, พิษวิทยา, ภูมิคุ้มกัน, และการปฏิสัมพันธ์ระหว่างเซลล์
- Tissue
- สมอง
- Synonyms
- BV-2
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- ไมโครเกลียลสัณฐานวิทยา
04Identifiers
- Citation
- BV2 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305156)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0182
05Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
- Dissociation reagent
- แอคคูเทส
- Subculturing
- รวบรวมเซลล์ที่ลอยในหลอดขนาด 15 มิลลิลิตร และล้างเซลล์ที่ติดผนังอย่างเบามือด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม (ใช้ 3-5 มิลลิลิตรสำหรับขวด T25 และ 5-10 มิลลิลิตรสำหรับขวด T75)นำ Accutase (1-2 มล. สำหรับขวด T25, 2.5 มล. สำหรับขวด T75) ใส่ให้ทั่วชั้นเซลล์อย่างทั่วถึง ปล่อยให้เซลล์พักที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 10 นาที หลังจากนั้นรวมและปั่นเหวี่ยงทั้งเซลล์แขวนลอยและเซลล์ที่เกาะติด หลังจากปั่นเหวี่ยงแล้ว ให้นำเซลล์ที่ตกตะกอนมาแขวนลอยอย่างระมัดระวังและถ่ายเซลล์แขวนลอยไปยังขวดใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์สด
- Fluid renewal
- 2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
07Donor
- Breed / subspecies
- C57BL/6
- Donor age
- 1 สัปดาห์
08Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
