BV2

As células BV2 são uma linhagem de células microgliais derivadas do camundongo C57BL/6, uma linhagem de camundongos de laboratório amplamente utilizada em experimentos com animais. Essas células microgliais foram imortalizadas por meio do retrovírus J2, que carrega os oncogenes v-raf e v-myc, resultando em uma linhagem celular estável com características únicas. As células BV2 expressam os oncogenes v-myc no núcleo e v-RAF no citoplasma, além do antígeno env gp70 em sua superfície, o que contribui para seu papel nas respostas imunológicas e na inflamação no cérebro. Uma das principais vantagens das células BV2 é sua capacidade de reter as características morfológicas e funcionais da microglia primária, as células imunes residentes do sistema nervoso central, tornando-as um modelo ideal para o estudo da neurodegeneração e da inflamação cerebral.

O papel da microglia na neurodegeneração, toxicologia e imunidade, particularmente em condições como a doença de Alzheimer, é um campo em constante crescimento na pesquisa biomédica. Estudos tradicionais frequentemente dependem de culturas de microglia primária e preparações celulares contínuas. O uso de uma linhagem celular semelhante à microglia, como as células BV2, oferece uma alternativa promissora ao fornecer uma fonte contínua e reproduzível de microglia. As células BV2, devido à expressão de v-raf/v-myc, apresentam metabolismo e crescimento intensificados, o que as torna ideais para pesquisas sobre ativação microglial e inflamação. Sua expressão de oncogenes e antígenos específicos se assemelha à dos macrófagos, tornando-as valiosas para o estudo de respostas imunológicas e mecanismos de doenças.

Uma reavaliação recente das células de microglia BV2 em camundongos examinou sua adequação como substituto da microglia primária (PM). A resposta das células BV2 ao lipopolissacarídeo foi comparada à da microglia tanto em condições in vitro quanto in vivo; no entanto, a regulação positiva dos genes foi, em média, ligeiramente menos pronunciada. As células BV2 apresentaram regulação normal do óxido nítrico e resposta funcional ao IFN-gama, parâmetros críticos para sua interação com células T, neurônios e outras células gliais, como os astrócitos. Verificou-se também que as células BV2 estimulam outras células gliais de forma eficaz, levando à produção de interleucina-6 (IL-6) nos astrócitos.

Essa interação entre astrócitos e microglia é crucial para a compreensão das complexas interações célula-célula e da resposta inflamatória no cérebro, especialmente no contexto de doenças neurodegenerativas como o Alzheimer, nas quais proteínas como NAPoe31 e NAPoe41, bem como vias como a resposta de sobressalto e a apoptose, desempenham papéis significativos.

As células BV2 oferecem uma ferramenta robusta e confiável para pesquisadores na área da biologia da microglia. Sua expressão de produtos dos oncogenes v-raf/v-myc permite que elas mantenham características-chave da microglia e dos macrófagos. As células BV2 provaram ser um substituto válido para a microglia primária em diversos contextos experimentais, facilitando pesquisas sobre neurodegeneração, toxicologia, imunidade e interações célula-célula.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.