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DH82
Disease
Sarcome histiocytaire canin
Synonyms
DH-82, DH 82

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DH82

Cell line · Product number 305003

DH-82 cells, derived from the malignant histiocytosis of a ten-year-old male Golden Retriever, are a cornerstone in the study of canine immunology and rel...

US$395.00excl. tax and shipping
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Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

Les cellules DH-82, issues de l’histiocytose maligne d’un golden retriever mâle âgé de dix ans, constituent une pierre angulaire de l’étude de l’immunologie canine et des maladies qui y sont associées.

Ces cellules présentent une morphologie semblable à celle des macrophages et reproduisent les fonctions clés des macrophages humains, offrant ainsi un modèle pertinent pour l’étude de divers aspects de la santé canine, en particulier les affections liées au système immunitaire.

Une caractéristique déterminante des cellules DH-82 est leur capacité à phagocyter des particules de latex, une fonction essentielle des macrophages chargés d’éliminer les substances étrangères de l’organisme. Cette propriété fait des cellules DH-82 un outil fiable pour approfondir la compréhension des réponses immunitaires chez les chiens, notamment face aux infections et aux maladies inflammatoires. L’expression des récepteurs Fc gamma dans les cellules DH-82 constitue une caractéristique notable.

Ces récepteurs jouent un rôle essentiel dans les réponses immunitaires, car ils se lient aux anticorps et facilitent la phagocytose des agents pathogènes ou des particules recouvertes d’anticorps. Cela rend les cellules DH-82 particulièrement précieuses dans les études portant sur les réponses immunitaires et la cytotoxicité cellulaire dépendante des anticorps (ADCC). En revanche, les cellules DH-82 n’expriment pas les récepteurs Fc mu ni les récepteurs C3b.

L’absence de récepteurs Fc mu, que l’on trouve habituellement sur les cellules B et qui participent à la présentation des antigènes, ainsi que de récepteurs C3b, qui se lient aux protéines du complément lors des réponses immunitaires, offre un cadre contrôlé pour l’étude de mécanismes immunitaires spécifiques susceptibles d’être influencés par ces récepteurs.

De plus, les cellules DH-82 ne produisent pas d’IL-1, une cytokine essentielle dans les réponses inflammatoires. Cette caractéristique offre une perspective unique pour étudier le rôle de l’IL-1 dans divers processus biologiques et pour comprendre les maladies médiées par l’IL-1.

Dans le domaine des maladies infectieuses, les cellules DH-82 se sont révélées particulièrement utiles pour l’étude de l’ehrlichiose monocytaire canine (CME), une maladie transmise par les tiques et causée par Ehrlichia canis.

Ces cellules offrent un milieu propice à la croissance de la bactérie, ce qui facilite l’étude de l’évolution de la maladie et la recherche de traitements potentiels. Le temps de doublement des cellules DH-82, d’environ 26 heures, constitue également un aspect crucial de leur utilisation, car il influe sur la conception des expériences et l’interprétation des résultats.

Disease
Sarcome histiocytaire canin
Synonyms
  • DH-82
  • DH 82

02Classification

Organism
Dog
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De type macrophage
Cell type
Histiocyte

04Identifiers

Citation
DH82 (numéro de catalogue Cytion 305003)
NCBI TaxID
9615
Cellosaurus
CVCL_2018

05Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), contenant : 2 mM de L-glutamine, 2,2 g/L de NaHCO₃, et EBSS (référence Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter au milieu 10 % de FBS et 1 % de NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donor

Breed / subspecies
Golden retriever
Donor age
10 ans