DH82
Cell line · Product number 305003
DH-82 cells, derived from the malignant histiocytosis of a ten-year-old male Golden Retriever, are a cornerstone in the study of canine immunology and rel...
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01General information
- Description
DH-82 细胞来源于一只十岁雄性金毛寻回犬的恶性组织细胞增生症,是研究犬类免疫学和相关疾病的基石。
这些细胞呈现出类似巨噬细胞的形态,反映了人类巨噬细胞的主要功能,从而为研究犬类健康的各个方面,特别是与免疫系统相关的疾病提供了一个相关模型。
DH-82 细胞的一个显著特点是具有吞噬乳胶颗粒的能力,这是巨噬细胞负责清除体内异物的基本功能。这一特性使 DH-82 细胞成为研究狗免疫反应的有力工具,尤其是在面对感染和炎症疾病时。DH-82 细胞表达 Fc γ 受体是一个显著特征。
这些受体是免疫反应不可或缺的组成部分,因为它们能与抗体结合,促进吞噬抗体包被的病原体或颗粒。这使得 DH-82 细胞在研究免疫反应和抗体依赖性细胞毒性(ADCC)时显得尤为重要。相比之下,DH-82 细胞不表达 Fc mu 和 C3b 受体。
Fc mu 受体通常存在于 B 细胞上,参与抗原递呈,而 C3b 受体则在免疫反应中与补体蛋白结合,DH-82 细胞不表达 Fc mu 受体和 C3b 受体为研究可能受这些受体影响的特定免疫机制提供了受控环境。
此外,DH-82 细胞不产生 IL-1,IL-1 是炎症反应中的一种关键细胞因子。这一特点为研究 IL-1 在各种生物过程中的作用和了解 IL-1 介导的疾病提供了一个独特的视角。
在传染病领域,DH-82 细胞被证明在研究犬单核细胞埃希氏菌病(CME)(一种由犬埃希氏菌引起的蜱媒疾病)方面特别有用。
这种细胞为细菌的生长提供了有利的环境,有助于探索疾病的发展和潜在的治疗方法。DH-82 细胞的倍增时间约为 26 小时,这也是其使用中的一个关键因素,影响着实验设计和结果解释。
- Disease
- 犬组织细胞肉瘤
- Synonyms
- DH-82
- DH 82
02Classification
- Organism
- Dog
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 类巨噬细胞
- Cell type
- 组织细胞
04Identifiers
- Citation
- DH82(Cytion 产品编号 305003)
- NCBI TaxID
- 9615
- Cellosaurus
- CVCL_2018
05Handling and culture
- Culture medium
- EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Fluid renewal
- 每周 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
07Donor
- Breed / subspecies
- 金毛寻回猎犬
- Donor age
- 10 年
08Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时,必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时,必须穿戴适当的防护手套和防护服,并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险,因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion,我们保证产品的质量和活力。 我们保证,从我们的工厂发货后 60 天内,我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息,请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
