DH82
Cell line · Product number 305003
DH-82 cells, derived from the malignant histiocytosis of a ten-year-old male Golden Retriever, are a cornerstone in the study of canine immunology and rel...
Customization / Recommendations
- DH82Cell line€430.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
เซลล์ DH-82 ซึ่งได้มาจากมะเร็งฮิสติโอไซโตซิสในสุนัขพันธุ์โกลเด้น รีทรีฟเวอร์เพศผู้ อายุสิบปี เป็นรากฐานสำคัญในการศึกษาภูมิคุ้มกันของสุนัขและโรคที่เกี่ยวข้อง
เซลล์เหล่านี้แสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาคล้ายแมคโครฟาจ สะท้อนถึงหน้าที่หลักของแมคโครฟาจในมนุษย์ จึงเป็นแบบจำลองที่มีความเกี่ยวข้องสำหรับการศึกษาด้านต่างๆ ของสุขภาพสุนัข โดยเฉพาะภาวะที่เกี่ยวข้องกับระบบภูมิคุ้มกัน
ลักษณะเด่นของเซลล์ DH-82 คือความสามารถในการฟาโกไซโตสอนุภาคยางธรรมชาติ ซึ่งเป็นหน้าที่สำคัญของแมคโครฟาจในการกำจัดสารแปลกปลอมในร่างกาย คุณสมบัตินี้ทำให้เซลล์ DH-82 เป็นเครื่องมือที่แข็งแกร่งสำหรับการศึกษาการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันในสุนัข โดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อเผชิญกับการติดเชื้อและโรคอักเสบ การแสดงออกของตัวรับ Fc gamma ในเซลล์ DH-82 เป็นลักษณะที่โดดเด่น
ตัวรับเหล่านี้มีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกัน เนื่องจากพวกมันสามารถจับกับแอนติบอดีและช่วยในกระบวนการฟาโกไซโทซิสของเชื้อโรคหรืออนุภาคที่ถูกเคลือบด้วยแอนติบอดีได้ ซึ่งทำให้เซลล์ DH-82 มีคุณค่าอย่างยิ่งในการศึกษาที่มุ่งเน้นไปที่การตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันและการทำลายเซลล์โดยแอนติบอดี (Antibody-dependent cellular cytotoxicity หรือ ADCC) อย่างไรก็ตาม เซลล์ DH-82 ไม่มีการแสดงออกของตัวรับ Fc mu และ C3b
การขาดหายไปของตัวรับ Fc mu ซึ่งปกติพบอยู่บนเซลล์ B และมีบทบาทในการนำเสนอแอนติเจน และตัวรับ C3b ซึ่งจับกับโปรตีนเสริมในกระบวนการตอบสนองทางภูมิคุ้มกัน สร้างสภาพแวดล้อมที่ควบคุมได้สำหรับการศึกษาการทำงานของกลไกภูมิคุ้มกันเฉพาะที่อาจได้รับอิทธิพลจากตัวรับเหล่านี้
นอกจากนี้ เซลล์ DH-82 ยังไม่ผลิต IL-1 ซึ่งเป็นไซโตไคน์สำคัญในการตอบสนองการอักเสบ คุณลักษณะนี้ให้มุมมองที่เป็นเอกลักษณ์ในการศึกษาบทบาทของ IL-1 ในกระบวนการทางชีววิทยาต่างๆ และทำความเข้าใจโรคที่เกี่ยวข้องกับ IL-1
ในวงการโรคติดเชื้อ เซลล์ DH-82 ได้พิสูจน์แล้วว่ามีประโยชน์อย่างยิ่งในการศึกษาโรค Ehrlichiosis แบบโมโนไซต์ในสุนัข (CME) ซึ่งเป็นโรคที่เกิดจากเห็บและเกิดจากเชื้อ Ehrlichia canis.
เซลล์เหล่านี้สร้างสภาพแวดล้อมที่เอื้ออำนวยต่อการเจริญเติบโตของแบคทีเรีย ช่วยในการสำรวจการพัฒนาของโรคและแนวทางการรักษาที่เป็นไปได้ ระยะเวลาในการเพิ่มจำนวนของเซลล์ DH-82 ประมาณ 26 ชั่วโมง ยังเป็นปัจจัยสำคัญในการใช้งานเซลล์เหล่านี้ ซึ่งมีอิทธิพลต่อการออกแบบการทดลองและการตีความผลลัพธ์
- Disease
- มะเร็งเนื้อเยื่อฮิสติโอไซต์ในสุนัข
- Synonyms
- DH-82
- DH 82
02Classification
- Organism
- Dog
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- คล้ายมาโครฟาจ
- Cell type
- ฮิสติโอไซต์
04Identifiers
- Citation
- DH82 (หมายเลขในแคตตาล็อก Cytion 305003)
- NCBI TaxID
- 9615
- Cellosaurus
- CVCL_2018
05Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
- Dissociation reagent
- แอคคูเทส
- Subculturing
- นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
- Fluid renewal
- 2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
07Donor
- Breed / subspecies
- โกลเด้น รีทรีฟเวอร์
- Donor age
- 10 ปี
08Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
