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DH82
Disease
犬組織細胞肉瘤
Synonyms
DH-82, DH 82

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DH82

Cell line · Product number 305003

DH-82 cells, derived from the malignant histiocytosis of a ten-year-old male Golden Retriever, are a cornerstone in the study of canine immunology and rel...

US$395.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

DH-82 細胞源自一隻十歲雄性金毛尋回犬的惡性組織細胞增生症,是犬類免疫學及相關疾病研究的重要基礎。

這些細胞呈現類似巨噬細胞的形態,並具備與人類巨噬細胞相仿的關鍵功能,因此成為研究犬隻健康各方面——尤其是免疫系統相關病症——的重要模型。

DH-82 細胞的一大特徵是其能夠吞噬乳膠微粒,這是巨噬細胞負責清除體內異物的一項基本功能。這項特性使 DH-82 細胞成為深入探究犬隻免疫反應的強大工具,特別是在面對感染和炎症性疾病時。 DH-82 細胞中 Fc γ 受體的表達是一項顯著特徵。

這些受體是免疫反應不可或缺的組成部分,因為它們能與抗體結合,並促進對抗體包被的病原體或顆粒的吞噬作用。這使得 DH-82 細胞在專注於免疫反應和抗體依賴性細胞毒性(ADCC)的研究中尤為寶貴。 相較之下,DH-82 細胞並不表達 Fc μ 受體和 C3b 受體。

由於缺乏通常存在於 B 細胞且參與抗原呈遞的 Fc μ 受體,以及在免疫反應中與補體蛋白結合的 C3b 受體,這為研究可能受這些受體影響的特定免疫機制提供了受控環境。

此外,DH-82 細胞不產生 IL-1——這是一種在發炎反應中起關鍵作用的細胞因子。此特性為探究 IL-1 在各種生物過程中所扮演的角色,以及理解由 IL-1 介導的疾病,提供了獨特的視角。

在傳染病領域,DH-82 細胞在研究犬單核細胞埃立克體病(CME)方面已證明特別有用,這是一種由犬埃立克體(Ehrlichia canis)引起的蜱媒傳染病。

這些細胞為該細菌的生長提供了有利環境,有助於探索該疾病的發病機制及潛在治療方法。DH-82 細胞的倍增時間約為 26 小時,這也是其應用中的關鍵因素,會影響實驗設計與結果的詮釋。

Disease
犬組織細胞肉瘤
Synonyms
  • DH-82
  • DH 82

02Classification

Organism
Dog
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
巨噬細胞樣
Cell type
組織細胞

04Identifiers

Citation
DH82(Cytion 型號 305003)
NCBI TaxID
9615
Cellosaurus
CVCL_2018

05Handling and culture

Culture medium
EMEM(MEM Eagle),含 2 mM L-谷氨醯胺,含 2.2 g/L NaHCO₃,含 EBSS(Cytion 產品編號 820100a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 10% FBS 和 1% NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Fluid renewal
每週 2 至 3 次
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

07Donor

Breed / subspecies
金毛尋回犬
Donor age
10年