Skip to content
DH82
Disease
סרקומה היסטיוציטית כלבית
Synonyms
DH-82, DH 82

Documents

DH82

Cell line · Product number 305003

DH-82 cells, derived from the malignant histiocytosis of a ten-year-old male Golden Retriever, are a cornerstone in the study of canine immunology and rel...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

תאי DH-82, שמקורם בהיסטוציטוזיס ממאיר של כלב גולדן רטריבר זכר בן עשר, מהווים אבן דרך במחקר של אימונולוגיה כלבית ומחלות נלוות.

תאים אלה מציגים מורפולוגיה דמוית מקרופאג, המשקפת את הפונקציות המרכזיות של מקרופאגים אנושיים, ובכך מספקים מודל רלוונטי לחקר היבטים שונים של בריאות כלבים, במיוחד מחלות הקשורות למערכת החיסון.

מאפיין בולט של תאי DH-82 הוא יכולתם לבלוע חלקיקי לטקס, תפקוד חיוני של מקרופאגים האחראים על סילוק חומרים זרים מהגוף. תכונה זו הופכת את תאי DH-82 לכלי יעיל לחקר התגובות החיסוניות של כלבים, במיוחד לנוכח זיהומים ומחלות דלקתיות. ביטוי קולטני Fc gamma בתאי DH-82 הוא תכונה בולטת.

קולטנים אלה הם חלק בלתי נפרד מתגובות חיסוניות, שכן הם נקשרים לנוגדנים ומסייעים בפגוציטוזה של פתוגנים או חלקיקים המצופים בנוגדנים. תכונה זו הופכת את תאי DH-82 ליקרים במיוחד במחקרים המתמקדים בתגובות חיסוניות ובתאיות תאיות תלויות נוגדנים (ADCC). לעומת זאת, תאי DH-82 אינם מבטאים קולטני Fc mu ו-C3b.

היעדר קולטני Fc mu, הנמצאים בדרך כלל בתאי B ומעורבים בהצגת אנטיגנים, וקולטני C3b, הנקשרים לחלבוני השלמה בתגובות חיסוניות, מספק סביבה מבוקרת לבחינת מנגנונים חיסוניים ספציפיים העלולים להיות מושפעים מקולטנים אלה.

בנוסף, תאי DH-82 אינם מייצרים IL-1, ציטוקין מרכזי בתגובות דלקתיות. תכונה זו מציעה פרספקטיבה ייחודית לחקר תפקידו של IL-1 בתהליכים ביולוגיים שונים ולהבנת מחלות המתווכות על ידי IL-1.

בתחום מחלות זיהומיות, תאי DH-82 הוכחו כשימושיים במיוחד בחקר מחלת ארליכיוזיס מונוציטית בכלבים (CME), מחלה המועברת על ידי קרציות ונגרמת על ידי Ehrlichia canis.

התאים מספקים סביבה נוחה לגידול החיידק, ומסייעים בחקר התפתחות המחלה וטיפולים אפשריים. זמן הכפלת תאי DH-82, כ-26 שעות, הוא גם היבט קריטי בשימוש בהם, המשפיע על תכנון הניסוי ופרשנות התוצאות.

Disease
סרקומה היסטיוציטית כלבית
Synonyms
  • DH-82
  • DH 82

02Classification

Organism
Dog
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי מקרופאג
Cell type
היסטוציט

04Identifiers

Citation
DH82 (מספר קטלוג של Cytion: 305003)
NCBI TaxID
9615
Cellosaurus
CVCL_2018

05Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Breed / subspecies
גולדן רטריבר
Donor age
10 שנים