HEK293-VEGFR2

Avertissement : Les prix indiqués pour les lignées cellulaires s’adressent exclusivement aux clients du milieu universitaire ou à but non lucratif. Pour les entités commerciales, le prix est d’environ 6 250 €.
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Les cellules HEK293-VEGFR2 sont des cellules rénales embryonnaires humaines 293 (HEK293) modifiées génétiquement pour exprimer de manière stable le récepteur 2 du facteur de croissance endothélial vasculaire humain (VEGFR2/KDR/Flk-1), une tyrosine kinase de récepteur qui agit comme principal médiateur de la signalisation angiogénique induite par le VEGF. Le VEGFR2 est principalement exprimé sur les cellules endothéliales et joue un rôle essentiel dans le développement vasculaire, la prolifération, la migration, la perméabilité et la survie des cellules endothéliales par l’activation de voies en aval, notamment les cascades de signalisation des familles MAPK/ERK, PI3K/AKT, PLCγ et SRC. Une dérégulation de la signalisation du VEGFR2 contribue à l’angiogenèse tumorale, au remodelage vasculaire inflammatoire et à la néovascularisation pathologique, faisant de ce récepteur une cible majeure dans les traitements oncologiques et des maladies vasculaires.

Les cellules HEK293-VEGFR2 sont largement utilisées dans la recherche sur l’angiogenèse et la découverte de médicaments pour la caractérisation d’anticorps monoclonaux ciblant le VEGFR2, d’inhibiteurs de tyrosine kinase, de pièges à ligands, d’anticorps bispécifiques et de produits biologiques anti-angiogéniques. Ce système d’expression recombinant stable permet l’évaluation quantitative de la liaison du ligand du VEGF, de la phosphorylation du récepteur, de l’activation de la voie de signalisation en aval, de l’internalisation du récepteur et de la puissance des inhibiteurs. Ces cellules sont également couramment utilisées dans les essais de rapporteurs, les études de liaison par cytométrie en flux, les essais d’activité kinase et les processus de criblage thérapeutique à haut débit. Comme les cellules HEK293 permettent une expression robuste de protéines recombinantes et une propagation efficace, elles constituent une plateforme fiable pour le développement d’essais standardisés sur le VEGFR2 et les études mécanistiques de la signalisation.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

Après la décongélation, répartissez les cellules dans des flacons T25 selon un rapport de 1:2 à 1:3 et laissez-les se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.

Pour optimiser l’adhérence et la viabilité des cellules après la décongélation, nous recommandons d’utiliser des flacons ou des plaques enduits de collagène pour l’ensemencement initial après la cryorécupération. L’enduction de collagène n’est pas nécessaire pour la culture de routine ultérieure des cellules.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.