HEK293-VEGFR2

Aviso legal: Os preços exibidos para as linhagens celulares são exclusivos para clientes acadêmicos ou sem fins lucrativos. Para entidades comerciais, o preço é de aproximadamente €6.250.
Se você representa uma entidade comercial ou não tem certeza de qual categoria se aplica, por favor, entre em contato conosco.

As células HEK293-VEGFR2 são células renais embrionárias humanas 293 (HEK293) modificadas geneticamente para expressar de forma estável o receptor 2 do fator de crescimento endotelial vascular humano (VEGFR2/KDR/Flk-1), um receptor tirosina quinase que atua como principal mediador da sinalização angiogênica induzida pelo VEGF. O VEGFR2 é expresso principalmente em células endoteliais e desempenha papéis essenciais no desenvolvimento vascular, na proliferação, migração, permeabilidade e sobrevivência das células endoteliais por meio da ativação de vias a jusante, incluindo as cascatas de sinalização das famílias MAPK/ERK, PI3K/AKT, PLCγ e SRC. A desregulação da sinalização do VEGFR2 contribui para a angiogênese tumoral, a remodelação vascular inflamatória e a neovascularização patológica, tornando o receptor um alvo importante na terapia de doenças oncológicas e vasculares.

As células HEK293-VEGFR2 são amplamente utilizadas em pesquisas sobre angiogênese e no desenvolvimento de medicamentos para a caracterização de anticorpos monoclonais direcionados ao VEGFR2, inibidores de tirosina quinase, armadilhas de ligantes, anticorpos bispecíficos e produtos biológicos antiangiogênicos. O sistema de expressão recombinante estável permite a avaliação quantitativa da ligação do ligante do VEGF, da fosforilação do receptor, da ativação da sinalização a jusante, da internalização do receptor e da potência do inibidor. Essas células também são comumente empregadas em ensaios com repórteres, estudos de ligação baseados em citometria de fluxo, ensaios de atividade de quinase e fluxos de trabalho de triagem terapêutica de alto rendimento. Como as células HEK293 permitem uma expressão robusta de proteínas recombinantes e uma propagação eficiente, elas fornecem uma plataforma confiável para o desenvolvimento padronizado de ensaios com VEGFR2 e estudos mecanísticos de sinalização.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Após o descongelamento, divida as células na proporção de 1:2 a 1:3 em frascos T25 e deixe que elas se recuperem do processo de congelamento e se adiram por pelo menos 24 horas.

Para obter melhor aderência e viabilidade após o descongelamento das células, recomendamos o uso de frascos ou placas revestidos com colágeno para a semeadura inicial após a recuperação criogênica. O revestimento com colágeno não é necessário para a cultura de rotina subsequente das células.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.