HEK293T/17

A linhagem celular 293T/17 é uma variante imortalizada da linhagem HEK293, derivada de células renais embrionárias humanas e amplamente utilizada em pesquisas, particularmente no estudo e na produção de vetores retrovirais e lentivirais. Essa linha celular foi modificada para expressar o antígeno T grande do SV40, aumentando sua utilidade na produção de vetores virais. A expressão do antígeno T grande do SV40 é uma característica fundamental que permite que essas células repliquem plasmídeos contendo a origem de replicação do SV40, aumentando significativamente o rendimento do DNA plasmídico em procedimentos de transfecção transitória. Essa característica é particularmente benéfica para a produção de vetores virais.

As células 293T/17 são essenciais na produção de vetores virais, como retrovírus e lentivírus. Elas produzem partículas virais com eficiência devido à sua capacidade de amplificar plasmídeos transfectados e facilitar a montagem e a liberação viral. Isso as torna uma ferramenta vital na pesquisa em terapia gênica, onde esses vetores são utilizados para introduzir material genético nas células-hospedeiras. As células apresentam alta eficiência de transfecção, crucial para a introdução e expressão bem-sucedidas de DNA estranho durante a construção de vetores. Essa alta eficiência permite o estudo da função gênica e a geração eficaz de proteínas recombinantes.

As capacidades robustas da linhagem celular 293T/17 a tornam inestimável tanto para a pesquisa científica básica quanto para aplicações terapêuticas. Ela é amplamente utilizada em biologia molecular e engenharia genética para a expressão de proteínas, análise da função gênica e o desenvolvimento de novas terapias gênicas. A eficiência da linhagem celular na produção de vetores virais facilita experimentos que exigem a entrega de material genético, tornando-a um pilar no campo da virologia. A linhagem celular 293T/17 continua a desempenhar um papel fundamental no avanço de nossa compreensão da função gênica e no desenvolvimento de intervenções terapêuticas.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.