Přejít na obsah
HEK293T/17
Tkáň
Embryonální ledvina
Synonyma
HEK293T/17, HEK-293T/17, HEK 293T/17

Dokumenty

HEK293T/17

Cell line · Číslo výrobku 305117

The 293T/17 cell line is an immortalized variant of the HEK293 line, derived from human embryonic kidney cells and extensively utilized in research, parti...

€550.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie 293T/17 je imortalizovaná varianta linie HEK293, odvozená z lidských embryonálních ledvinových buněk a hojně využívaná ve výzkumu, zejména při studiu a výrobě retrovirových a lentivirových vektorů. Tato buněčná linie byla modifikována tak, aby exprimovala velký antigen SV40 T, což zvyšuje její použitelnost při výrobě virových vektorů. Exprese velkého antigenu SV40 T je klíčovou vlastností, která těmto buňkám umožňuje replikovat plazmidy obsahující replikační původ SV40, což výrazně zvyšuje výtěžnost plazmidové DNA při transientních transfekčních postupech. Tato vlastnost je zvláště výhodná pro výrobu virových vektorů.

buňky 293T/17 jsou nezbytné pro výrobu virových vektorů, jako jsou retroviry a lentiviry. Účinně produkují virové částice díky své schopnosti amplifikovat transfekované plazmidy a podporovat sestavování a uvolňování virů. To z nich činí důležitý nástroj ve výzkumu genové terapie, kde se tyto vektory používají k doručení genetického materiálu do hostitelských buněk. Buňky vykazují vysokou transfekční účinnost, která je rozhodující pro úspěšné zavedení a expresi cizí DNA při konstrukci vektoru. Tato vysoká účinnost umožňuje efektivní studium funkce genů a tvorbu rekombinantních proteinů.

Robustní schopnosti buněčné linie 293T/17 ji činí neocenitelnou jak pro základní vědecký výzkum, tak pro terapeutické aplikace. Je široce využívána v molekulární biologii a genovém inženýrství pro expresi proteinů, analýzu funkce genů a vývoj nových genových terapií. Účinnost buněčné linie při produkci virových vektorů usnadňuje experimenty vyžadující přenos genetického materiálu, což z ní činí základní kámen v oblasti virologie. Buněčná linie 293T/17 hraje i nadále klíčovou roli při zlepšování našeho chápání funkce genů a vývoji terapeutických zásahů.

Tkáň
Embryonální ledvina
Aplikace
Tato buněčná linie je optimální volbou pro transfekci, vysoce výkonný screening, toxikologii a vývoj vakcín.
Synonyma
  • HEK293T/17
  • HEK-293T/17
  • HEK 293T/17

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This HEK293T/17 cell line contains SV40, enhancing plasmid replication and packaging efficiency. The insert is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelové

04Identifikátory

Citace
HEK293T/17 (katalogové číslo Cytion 305117)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1926

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
SV40 T antigen
Viry
SV40 (exprimuje SV40 T antigen)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
Plod