HEK293A

Buněčná linie HEK293A, derivát buněk lidské embryonální ledviny 293 (HEK293), představuje specializovaný nástroj ve virologickém výzkumu a výzkumu genové terapie, zejména při produkci, amplifikaci a titraci replikačně nekompetentních adenovirů. Tyto buňky vykazují plochou morfologii, která významně napomáhá mikroskopickému zkoumání a titraci a usnadňuje počítání a hodnocení virových částic.

Klíčovou vlastností buněčné linie HEK293A je stabilní integrace genu E1 adenoviru do jejího genomu. Tato integrace má zásadní význam, protože poskytuje nezbytný transkripční mechanismus pro expresi proteinů E1, konkrétně E1a a E1b. Přítomnost těchto proteinů je nezbytná pro replikaci adenovirových vektorů v buňce. Protein E1a funguje především při aktivaci transkripce adenovirového genomu, zatímco proteiny E1b se podílejí na virové replikaci a narušení buněčného cyklu.

Využitelnost buněk HEK293A přesahuje pouhou podporu virové replikace. Tyto buňky usnadňují účinnou produkci vysoce kvalitních virových preparátů ve vysokém titru, které jsou nezbytné jak pro základní výzkum, tak pro terapeutické aplikace. Robustní replikační kapacita buněčné linie a snadná manipulace s ní umožňují výzkumným pracovníkům provádět screening a vyvíjet adenovirové konstrukty s nebývalou přesností a účinností.

Lze shrnout, že buněčná linie HEK293A je nepostradatelným zdrojem v oblasti virologie a genové terapie. Její schopnost stabilně exprimovat proteiny E1 a podporovat replikaci adenovirů z ní činí cenný nástroj pro výzkumníky, kteří chtějí vyrábět a manipulovat s adenovirovými vektory. Vlastnosti buněčné linie umožňují efektivní generování virových vektorů, což je zásadní pro pokrok ve výzkumu a potenciální terapeutické zásahy.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení