İçeriğe atla
HEK293A
Doku
Embriyonik böbrek
Eş anlamlılar
HEK-293A, HEK293A, HEK 293A, HEK293-A, QBI-HEK 293A, QBI-293A

HEK293A

Cell line · Ürün numarası 305070

İnsan embriyonik böbrek 293 (HEK293) hücrelerinin bir türevi olan HEK293A hücre hattı, viroloji ve gen terapisi araştırmalarında özel bir araç olarak kullanılmaktadır...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

İnsan embriyonik böbrek 293 (HEK293) hücrelerinin bir türevi olan HEK293A hücre hattı, virolojik ve gen terapisi araştırmalarında, özellikle de replikasyona yetkin olmayan adenovirüslerin üretimi, amplifikasyonu ve titrasyonunda özel bir aracı temsil etmektedir. Bu hücreler, mikroskobik inceleme ve titrasyon süreçlerine önemli ölçüde yardımcı olan ve viral partiküllerin sayılmasını ve değerlendirilmesini kolaylaştıran düz bir morfoloji sergiler.

HEK293A hücre hattının önemli bir özelliği, adenovirüs E1 geninin genomuna stabil entegrasyonudur. Bu entegrasyon, E1 proteinlerinin, özellikle E1a ve E1b'nin ekspresyonu için gerekli transkripsiyonel mekanizmayı sağladığından kritik öneme sahiptir. Bu proteinlerin varlığı adenoviral vektörlerin hücre içinde replikasyonu için gereklidir. E1a proteini öncelikle adenovirüs genomunun transkripsiyonunu aktive etmek için işlev görürken, E1b proteinleri viral replikasyon ve hücre döngüsü bozulmasında rol oynar.

HEK293A hücrelerinin faydası sadece viral replikasyonu desteklemenin ötesine uzanır. Bu hücreler, hem temel araştırmalar hem de terapötik uygulamalar için gerekli olan yüksek titreli, yüksek kaliteli viral preparatların verimli bir şekilde üretilmesini kolaylaştırır. Hücre hattının sağlam replikasyon kapasitesi ve kullanım kolaylığı, araştırmacıların adenoviral yapıları benzeri görülmemiş bir hassasiyet ve verimlilikle taramasını ve geliştirmesini sağlar.

Özetle, HEK293A hücre hattı viroloji ve gen terapisi alanında vazgeçilmez bir kaynaktır. E1 proteinlerini kararlı bir şekilde ifade etme ve adenoviral replikasyonu destekleme yeteneği, onu adenoviral vektörler üretmek ve manipüle etmek isteyen araştırmacılar için değerli bir araç haline getirmektedir. Hücre hattının özellikleri, araştırmaları ve potansiyel terapötik müdahaleleri ilerletmek için çok önemli olan viral vektörlerin verimli bir şekilde üretilmesine olanak tanır.

Doku
Embriyonik böbrek
Eş anlamlılar
  • HEK-293A
  • HEK293A
  • HEK 293A
  • HEK293-A
  • QBI-HEK 293A
  • QBI-293A

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This HEK293A cell line contains SV40 from Simian Virus 40, supporting enhanced transfection performance and proliferation. The construct is stably integrated into embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
HEK293A (Cytion katalog numarası 305070)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_6910

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
Fetüs