Mine otse sisu juurde
HEK293A
Kude
Embrüonaalne neer
Sünonüümid
HEK-293A, HEK293A, HEK 293A, HEK293-A, QBI-HEK 293A, QBI-293A

Dokumendid

HEK293A

Cell line · Toote number 305070

HEK293A rakuliin, mis on saadud inimese embrüonaalsetest neerurakkudest 293 (HEK293), on spetsialiseeritud vahend viroloogilistes ja geeniteraapia uuringutes...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HEK293A rakuliin, mis on inimese embrüonaalse neeru 293 (HEK293) rakkude derivaat, on spetsiaalne vahend viroloogilistes ja geeniteraapia uuringutes, eriti replikatsioonikompetentsete adenoviiruste tootmisel, amplifitseerimisel ja tiitrimisel. Nendel rakkudel on lame morfoloogia, mis aitab oluliselt kaasa mikroskoopilisele uurimisele ja tiitrimisprotsessile, muutes viiruseosakeste loendamise ja hindamise lihtsamaks.

HEK293A rakuliini keskne omadus on adenoviiruse E1 geeni stabiilne integreerimine selle genoomi. See integratsioon on kriitilise tähtsusega, sest see tagab E1 valkude, eriti E1a ja E1b, ekspressiooniks vajaliku transkriptsioonimehhanismi. Nende valkude olemasolu on oluline adenoviirusvektorite replikatsiooniks rakus. E1a valk toimib peamiselt adenoviiruse genoomi transkriptsiooni aktiveerimiseks, samal ajal kui E1b valgud osalevad viiruse replikatsioonis ja rakutsükli katkestamises.

HEK293A rakkude kasulikkus ulatub kaugemale kui ainult viiruse replikatsiooni toetamine. Need rakud hõlbustavad kõrgete tiitrite ja kvaliteetsete viiruspreparaatide tõhusat tootmist, mis on olulised nii alusuuringute kui ka terapeutiliste rakenduste jaoks. Rakuliini tugev replikatsioonivõime ja lihtne käsitsemine võimaldavad teadlastel sõeluda ja arendada adenoviiruskonstruktsioone enneolematu täpsuse ja tõhususega.

Kokkuvõttes on HEK293A rakuliin asendamatu ressurss viroloogia ja geeniteraapia valdkonnas. Selle võime stabiilselt ekspresseerida E1 valke ja toetada adenoviiruse replikatsiooni muudab selle väärtuslikuks vahendiks teadlastele, kes soovivad toota ja manipuleerida adenoviirusvektoreid. Rakuliini omadused võimaldavad tõhusalt genereerida viirusvektoreid, mis on teadusuuringute ja võimalike terapeutiliste sekkumiste edendamiseks hädavajalikud.

Kude
Embrüonaalne neer
Sünonüümid
  • HEK-293A
  • HEK293A
  • HEK 293A
  • HEK293-A
  • QBI-HEK 293A
  • QBI-293A

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This HEK293A cell line contains SV40 from Simian Virus 40, supporting enhanced transfection performance and proliferation. The construct is stably integrated into embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel

04Tunnused

Viide
HEK293A (Cytioni katalooginumber 305070)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_6910

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
Loote