HEK293T rakud

HEK 293T, mis on väga hästi transfitseeritav vanemraku HEK 293 tuletis, on biotehnoloogia valdkonnas mitmekülgne ja võimas vahend rekombinantsete valkude ja mitmesuguste vaktsiinide tootmiseks.

HEK-293T rakud on loodud embrüonaalsete neerude 293 rakkude transfekteerimisel SV40 suurt T antigeeni kodeeriva plasmiidiga. Esialgne HEK293 rakuliin arenes välja inimese embrüonaalse neerukoe epiteelirakkudest, kusjuures selle transformatsioon toimus teadlaste poolt läbi viidud 293. katses.

Vaktsiinide väljatöötamise valdkonnas on 293T embrüonaalsed neerurakud keskse tähtsusega viirusvektorite, sealhulgas adenoviirusvektorite tootmisel. HEK293T rakke transfekteeritakse spetsiifilistes kasvatustingimustes adenoviiruslikke ja retroviiruslikke elemente kandvate vektoritega, sealhulgas SV40 replikatsiooni algupäraga, mis viib viiruslike osakeste (VLP) tootmisele.

VLP-d, mis ei sisalda viiruse geneetilist materjali, on võtmetähtsusega alarühma- ja VLP-põhiste vaktsiinide aluseks. Rekombinantsete valkude tootmist 293T rakkudes hõlbustavad erinevad transfektsioonimeetodid, keskendudes AP-fusioonvalkude ja muude vaktsiinide antigeenset komponenti moodustavate valkude tüüpide genereerimisele.

293T rakuliini genoomitehnoloogilised võimalused võimaldavad ekspressioonikonstruktide kohandamist, mis suurendab veelgi viirusvektorite tootmist. See koos võimega toota valke suspensioonikultuuris või adherentsetes tingimustes teeb 293T rakuliinist kaasaegse vaktsiini arendamise täislahenduse.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest