Células HEK293T

Las células HEK 293T, un derivado altamente transfectable de la célula parental HEK 293, se destacan como una herramienta versátil y poderosa en el campo de la biotecnología para la producción de proteínas recombinantes y diversos tipos de vacunas.

Las células HEK-293T se generaron mediante la transfección de células renales embrionarias 293 con un plásmido que codifica el antígeno T grande del SV40. La línea celular HEK293 original se desarrolló a partir de células epiteliales de tejido renal embrionario humano, y su transformación ocurrió precisamente en el experimento número 293 realizado por los investigadores.

En el ámbito del desarrollo de vacunas, las células renales embrionarias 293T son fundamentales para la producción de vectores virales, incluidos los vectores adenovirales. Las células HEK293T, bajo condiciones específicas de cultivo, se transfectan con vectores que portan elementos adenovirales y retrovirales, incluido el origen de replicación del SV40, lo que conduce a la producción de partículas similares a virus (VLP).

Las VLP, que carecen de material genético viral, son fundamentales para sentar las bases de las vacunas de subunidades y basadas en VLP. La producción de proteínas recombinantes en las células 293T se ve facilitada por diversos métodos de transfección, con énfasis en la generación de proteínas de fusión AP y otros tipos de proteínas que forman el componente antigénico de las vacunas.

Las capacidades de ingeniería genómica de la línea celular 293T permiten la personalización de los constructos de expresión, lo que impulsa aún más la producción de vectores virales. Esto, junto con la capacidad de producir proteínas en cultivo en suspensión o en condiciones de adhesión, convierte a la línea celular 293T en una solución integral para el desarrollo moderno de vacunas.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.