HEK293T-Zellen

HEK 293T, ein hochgradig transfizierbares Derivat der elterlichen HEK 293-Zelle, zeichnet sich als vielseitiges und leistungsfähiges Werkzeug im Bereich der Biotechnologie für die Herstellung rekombinanter Proteine und verschiedener Arten von Impfstoffen aus.

HEK-293T-Zellen wurden durch Transfektion von 293-Embryonalnieren-Zellen mit einem Plasmid erzeugt, das für das große SV40-T-Antigen kodiert. Die ursprüngliche HEK293-Zelllinie wurde aus den Epithelzellen des menschlichen embryonalen Nierengewebes entwickelt, wobei die Umwandlung im 293.

Im Bereich der Impfstoffentwicklung sind die embryonalen 293T-Nierenzellen von zentraler Bedeutung für die Produktion von viralen Vektoren, einschließlich Adenovirus-Vektoren. HEK293T-Zellen werden unter bestimmten Kulturbedingungen mit Vektoren transfiziert, die adenovirale und retrovirale Elemente tragen, einschließlich des SV40-Replikationsursprungs, was zur Produktion von virusähnlichen Partikeln (VLPs) führt.

Die VLPs, die kein virales genetisches Material enthalten, bilden die Grundlage für Subunit- und VLP-basierte Impfstoffe. Die rekombinante Proteinproduktion in 293T-Zellen wird durch verschiedene Transfektionsmethoden erleichtert, wobei der Schwerpunkt auf der Erzeugung von AP-Fusionsproteinen und anderen Proteintypen liegt, die die antigene Komponente von Impfstoffen bilden.

Die Genom-Engineering-Fähigkeiten der 293T-Zelllinie ermöglichen die individuelle Anpassung von Expressionskonstrukten, was die Produktion von viralen Vektoren weiter fördert. In Verbindung mit der Fähigkeit, Proteine in Suspensionskultur oder unter adhärenten Bedingungen zu produzieren, macht dies die 293T-Zelllinie zu einer Komplettlösung für die moderne Impfstoffentwicklung.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung