תאי HEK293T

HEK 293T, נגזרת בעלת יכולת טרנספקציה גבוהה של תא HEK 293 ההורי, בולטת ככלי רב-תכליתי ועוצמתי בתחום הביוטכנולוגיה לייצור חלבונים רקומביננטיים וסוגים שונים של חיסונים.

תאי HEK-293T נוצרו על ידי טרנספקציה של תאי כליה עובריים 293 עם פלסמיד המקודד את האנטיגן T הגדול SV40. קו התאים HEK293 המקורי פותח מתאי אפיתל של רקמת כליה עוברת אנושית, והשינוי בו התרחש בניסוי ה-293 שביצעו החוקרים.

בתחום פיתוח החיסונים, תאי הכליה העובריים 293T הם חיוניים לייצור וקטורים נגיפיים, כולל וקטורים אדנו-ויראליים. תאי HEK293T, בתנאי תרבית ספציפיים, עוברים טרנספקציה עם וקטורים הנושאים אלמנטים אדנו-ויראליים ורטרו-ויראליים, כולל מקור השכפול SV40, מה שמוביל לייצור חלקיקים דמויי נגיפים (VLPs).

ה-VLPs, נטולי חומר גנטי נגיפי, הם מרכיב מרכזי ביצירת הבסיס לחיסונים מבוססי יחידות משנה ו-VLP. ייצור החלבון הרקומביננטי בתאי 293T מתאפשר באמצעות שיטות טרנספקציה שונות, עם דגש על יצירת חלבוני AP פיוז'ן וסוגים אחרים של חלבונים המהווים את המרכיב האנטיגני של חיסונים.

יכולות הנדסת הגנום של קו התאים 293T מאפשרות התאמה אישית של מבני ביטוי, מה שמגביר עוד יותר את ייצור הווקטורים הנגיפיים. זאת, בשילוב עם היכולת לייצר חלבונים בתרבית תלויה או בתנאים דבקים, הופכת את קו התאים 293T לפתרון מלא לפיתוח חיסונים מודרניים.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו