Células HEK293T

A HEK 293T, um derivado altamente transfectável da célula parental HEK 293, destaca-se como uma ferramenta versátil e poderosa no domínio da biotecnologia para a produção de proteínas recombinantes e vários tipos de vacinas.

As células HEK-293T foram geradas através da transfecção de células 293 de rim embrionário com um plasmídeo que codifica o antigénio SV40 large T. A linha celular HEK293 original foi desenvolvida a partir de células epiteliais de tecido renal embrionário humano, tendo a sua transformação ocorrido no que foi, nomeadamente, a 293ª experiência realizada pelos investigadores.

No domínio do desenvolvimento de vacinas, as células renais embrionárias 293T são essenciais para a produção de vectores virais, incluindo os vectores de adenovírus. As células HEK293T, em condições de cultura específicas, são transfectadas com vectores que transportam elementos adenovirais e retrovirais, incluindo a origem de replicação SV40, levando à produção de partículas semelhantes a vírus (VLPs).

As VLPs, desprovidas de material genético viral, são fundamentais para formar a base de vacinas baseadas em subunidades e VLPs. A produção de proteínas recombinantes em células 293T é facilitada por vários métodos de transfecção, com ênfase na geração de proteínas de fusão AP e outros tipos de proteínas que formam o componente antigénico das vacinas.

As capacidades de engenharia do genoma da linha celular 293T permitem a personalização de construções de expressão, aumentando ainda mais a produção de vectores virais. Isto, juntamente com a capacidade de produzir proteínas em cultura em suspensão ou em condições aderentes, faz da linha celular 293T uma solução completa para o desenvolvimento de vacinas modernas.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia