Komórki HEK293T

HEK 293T, wysoce transfekowalna pochodna macierzystej komórki HEK 293, wyróżnia się jako wszechstronne i potężne narzędzie w dziedzinie biotechnologii do produkcji rekombinowanych białek i różnego rodzaju szczepionek.

Komórki HEK-293T zostały wygenerowane przez transfekcję embrionalnych komórek nerki 293 plazmidem kodującym antygen SV40 large T. Oryginalna linia komórkowa HEK293 została opracowana z komórek nabłonkowych ludzkiej embrionalnej tkanki nerkowej, a jej transformacja nastąpiła w 293. eksperymencie przeprowadzonym przez naukowców.

W dziedzinie opracowywania szczepionek embrionalne komórki nerkowe 293T odgrywają kluczową rolę w produkcji wektorów wirusowych, w tym wektorów adenowirusowych. Komórki HEK293T, w określonych warunkach hodowli, są transfekowane wektorami niosącymi elementy adenowirusowe i retrowirusowe, w tym pochodzenie replikacji SV40, co prowadzi do produkcji cząstek wirusopodobnych (VLP).

Cząstki VLP, pozbawione materiału genetycznego wirusa, są kluczem do stworzenia podstawy szczepionek podjednostkowych i opartych na VLP. Produkcja rekombinowanych białek w komórkach 293T jest ułatwiona dzięki różnym metodom transfekcji, z naciskiem na wytwarzanie białek fuzyjnych AP i innych typów białek, które tworzą antygenowy składnik szczepionek.

Możliwości inżynierii genomu linii komórkowej 293T pozwalają na dostosowanie konstruktów ekspresji, co dodatkowo zwiększa produkcję wektorów wirusowych. To, w połączeniu ze zdolnością do produkcji białek w hodowli zawiesinowej lub w warunkach adherentnych, sprawia, że linia komórkowa 293T jest kompleksowym rozwiązaniem dla rozwoju nowoczesnych szczepionek.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym