เซลล์ HEK293T

HEK 293T ซึ่งเป็นอนุพันธ์ที่สามารถถ่ายโอนยีนได้ดีเยี่ยมของเซลล์ HEK 293 ต้นกำเนิด โดดเด่นในฐานะเครื่องมืออเนกประสงค์และทรงพลังในสาขาเทคโนโลยีชีวภาพสำหรับการผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์และวัคซีนหลากหลายประเภท

เซลล์ HEK-293T ถูกสร้างขึ้นโดยการถ่ายโอนพลาสมิดที่เข้ารหัสแอนติเจน T ขนาดใหญ่ของ SV40 เข้าสู่เซลล์ไตของตัวอ่อน 293 เซลล์ต้นกำเนิดของสายพันธุ์ HEK293 ถูกพัฒนาจากเซลล์เยื่อบุผิวของเนื้อเยื่อไตของตัวอ่อนมนุษย์ โดยการเปลี่ยนสภาพเกิดขึ้นในการทดลองครั้งที่ 293 ซึ่งเป็นที่รู้จักกันดีของนักวิจัย

ในแวดวงการพัฒนาวัคซีน เซลล์ไตของตัวอ่อนสายพันธุ์ 293T ถือเป็นองค์ประกอบสำคัญในการผลิตเวกเตอร์ไวรัส รวมถึงเวกเตอร์อะดีโนไวรัส เซลล์ HEK293T ภายใต้สภาวะการเพาะเลี้ยงเฉพาะ จะถูกถ่ายยีนด้วยเวกเตอร์ที่มีองค์ประกอบของอะดีโนไวรัสและเรโทรไวรัส รวมถึงต้นกำเนิดการจำลองแบบของ SV40 ซึ่งนำไปสู่การผลิตอนุภาคคล้ายไวรัส (VLPs)

VLPs ซึ่งปราศจากสารพันธุกรรมของไวรัส เป็นกุญแจสำคัญในการสร้างพื้นฐานของวัคซีนแบบซับยูนิตและวัคซีนที่ใช้ VLPs เป็นฐาน การผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์ในเซลล์ 293T ได้รับการอำนวยความสะดวกโดยวิธีการทรานส์เฟคชั่นหลากหลายวิธี โดยเน้นที่การสร้างโปรตีนฟิวชั่น AP และโปรตีนประเภทอื่นๆ ที่ประกอบเป็นองค์ประกอบแอนติเจนของวัคซีน

ความสามารถในการวิศวกรรมจีโนมของสายพันธุ์เซลล์ 293T ช่วยให้สามารถปรับแต่งโครงสร้างการแสดงออกของยีนได้ ซึ่งช่วยเพิ่มประสิทธิภาพการผลิตเวกเตอร์ไวรัสให้สูงขึ้น นอกจากนี้ ความสามารถในการผลิตโปรตีนในสภาพการเพาะเลี้ยงแบบแขวนลอยหรือแบบเกาะติด ทำให้สายพันธุ์เซลล์ 293T เป็นโซลูชันครบวงจรสำหรับการพัฒนาวัคซีนสมัยใหม่

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.