Skip to content
HEK293 suspension-adapted
Tissue
ไต

Documents

HEK293 suspension-adapted

Cell line · Product number 300686

The HEK293 suspension-adapted cell line is a variant of the human embryonic kidney 293 (HEK293) cells that has been modified to grow in suspension culture...

€500.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

สายเซลล์ HEK293 ที่ปรับให้เหมาะสมกับการเลี้ยงแบบแขวนลอยเป็นสายพันธุ์ที่ดัดแปลงมาจากเซลล์ไตของทารกในครรภ์มนุษย์ 293 (HEK293) ซึ่งถูกปรับให้สามารถเจริญเติบโตในสภาพแขวนลอยแทนการเลี้ยงแบบเกาะติด การปรับตัวนี้มีความสำคัญสำหรับการใช้งานในอุตสาหกรรมที่ต้องการการผลิตโปรตีนในปริมาณมากเซลล์เหล่านี้ยังคงลักษณะหลายประการของสายพันธุ์ HEK293 ดั้งเดิมไว้ รวมถึงประสิทธิภาพการถ่ายโอนยีนชั่วคราวที่สูงและความสามารถในการดัดแปลงโปรตีนที่แสดงออกหลังการแปลรหัสในลักษณะที่คล้ายคลึงกับเซลล์มนุษย์ตามธรรมชาติ

เซลล์เหล่านี้มีคุณค่าอย่างยิ่งในอุตสาหกรรมเทคโนโลยีชีวภาพและเภสัชกรรมสำหรับการผลิตโปรตีนและไวรัสที่สร้างขึ้นใหม่สำหรับการบำบัดทางพันธุกรรมและการพัฒนาวัคซีน การปรับตัวให้เข้ากับการเพาะเลี้ยงแบบแขวนลอยช่วยให้สามารถปรับขนาดได้ง่ายขึ้นและทำให้กระบวนการเก็บเกี่ยวง่ายขึ้น ทำให้เหมาะสมยิ่งขึ้นสำหรับการผลิตทางชีวภาพในระดับเชิงพาณิชย์สายเซลล์ HEK293 ที่ปรับให้เหมาะสมกับการแขวนลอยรองรับระบบการผลิตไวรัสหลากหลายชนิด รวมถึงอะดีโนไวรัส, เลนติไวรัส, และอะดีโน-แอสโซซิเอทไวรัส (AAV) ซึ่งมีความสำคัญอย่างยิ่งในการประยุกต์ใช้ทางการรักษาและการวิจัย

โดยรวมแล้ว สายเซลล์ HEK293 ที่ปรับให้เหมาะสมกับการแขวนลอยเป็นเครื่องมือที่สำคัญในสาขาชีววิทยาโมเลกุลและกระบวนการชีวภาพ โดยให้แพลตฟอร์มที่หลากหลายสำหรับการผลิตโมเลกุลที่มีฤทธิ์ทางชีวภาพต่างๆ ความง่ายในการดัดแปลงพันธุกรรมและความสามารถในการผลิตโปรตีนที่มีการพับตัวที่ถูกต้องและมีการดัดแปลงหลังการแปลตามรูปแบบของเซลล์มนุษย์ ทำให้เป็นทรัพยากรที่ขาดไม่ได้ในหลายสภาพแวดล้อมการรักษาและการวิจัยขั้นสูง

Tissue
ไต
Applications
โฮสต์สำหรับการถ่ายโอนยีน

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Suspension
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This suspension-adapted HEK293 cell line contains adenovirus 5-derived E1 sequences from the parental HEK293 line, supporting high proliferative and protein expression capacity. The modification is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
รอบ
Tumourigenic
ในหนูที่ไม่มีขน

04Identifiers

Citation
HEK293 ที่ปรับให้เข้ากับการแขวนลอย (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300686)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0045

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
วิตโรเนคติน
Protein expression
CEA เป็นลบ, p53 เป็นบวก
Virus susceptibility
เปลี่ยนแปลงด้วยดีเอ็นเออะดีโนไวรัส 5 ดีเอ็นเออะดีโนไวรัส 5

06Handling and culture

Culture medium
พานเซอร์ริน 293S (PanBiotech, เยอรมนี)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
ไม่จำเป็นต้องใช้ผลิตภัณฑ์เสริมอาหาร
Dissociation reagent
ไม่จำเป็น
Subculturing
รักษาเซลล์แขวนลอยให้มีความหนาแน่นของเซลล์อยู่ระหว่าง 5 x 105 ถึง 2-3 x 106 เซลล์/มล. ในขวดเพาะเลี้ยงเซลล์แบบ Eppendorf บนเครื่องเขย่าภายในตู้อบที่อุณหภูมิ 37°C/5% CO2 ทำการเพาะเลี้ยงใหม่เมื่อความหนาแน่นของเซลล์ถึง 2-3 x 106 เซลล์/มล. ระวังอย่าให้เซลล์จับตัวเป็นกลุ่มขณะย้ายเซลล์ เมื่อความหนาแน่นของเซลล์ถึง 1-2 x 106 เซลล์/มล. ให้เก็บเซลล์โดยการปั่นเหวี่ยงที่ 200xg เป็นเวลา 5 นาที แล้วทิ้งส่วนใสด้านบน นำเซลล์ไปเจือจางในปริมาณที่เหมาะสมของอาหารเลี้ยงเชื้อที่สดและอุ่นไว้ล่วงหน้า แล้วนับจำนวนเซลล์เพื่อหาข้อมูลเกี่ยวกับความมีชีวิตและจำนวนเซลล์ เก็บเซลล์โดยการปั่นเหวี่ยงที่ 200xg เป็นเวลา 5 นาที แล้วทิ้งส่วนใสด้านบน ละลายเซลล์ในปริมาณที่เหมาะสมของสารละลายแช่แข็งและนับจำนวนอีกครั้ง ความมีชีวิตของเซลล์ควรมีค่า >>80% ความหนาแน่นของเซลล์ที่แนะนำคือ 5-10 ล้านเซลล์/มล. ดูดเซลล์ด้วยปิเปตใส่ลงในหลอดแช่แข็งที่ติดฉลากไว้ล่วงหน้า ใช้ภาชนะแช่แข็ง CoolCell หรือตู้แช่แข็งแบบควบคุมอัตราการแช่แข็ง เพื่อให้แน่ใจว่าอัตราการลดอุณหภูมิอยู่ที่ 1°C/นาที
Seeding density
5 x 10^5 เซลล์/มล.
Post-thaw recovery
เริ่มต้นเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 105 เซลล์/มล. และรักษาความเข้มข้นของเซลล์ให้อยู่ระหว่าง 2-3 x 106 เซลล์/มล. เพื่อการเจริญเติบโตที่เหมาะสมที่สุด หมักที่อุณหภูมิ 37°C/ก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ 5% บนเครื่องเขย่าเซลล์ที่ความเร็ว 100-150 รอบต่อนาที
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
ทารกในครรภ์