الانتقال إلى المحتوى
HEK293 suspension-adapted
الأنسجة
الكلى

المستندات

HEK293 suspension-adapted

Cell line · رقم المنتج 300686

The HEK293 suspension-adapted cell line is a variant of the human embryonic kidney 293 (HEK293) cells that has been modified to grow in suspension culture...

€500.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
1

01معلومات عامة

الوصف

خط خلايا HEK293 المتكيفة مع التعليق هو نوع مختلف من خلايا الكلى الجنينية البشرية 293 (HEK293) التي تم تعديلها لتنمو في مزرعة معلقة بدلاً من مزرعة ملتصقة. هذا التكيف مهم للتطبيقات الصناعية التي تتطلب إنتاج البروتين على نطاق واسع. تحافظ الخلايا على العديد من خصائص خط HEK293 الأصلي، بما في ذلك كفاءة النقل العابر القوية والقدرة على تعديل البروتينات المعبر عنها بعد الترجمة بطريقة مشابهة لتلك التي تتمتع بها الخلايا البشرية الأصلية.

وتحظى هذه الخلايا بتقدير خاص في صناعات التكنولوجيا الحيوية والصناعات الدوائية لإنتاج البروتينات والفيروسات المؤتلفة للعلاج الجيني وتطوير اللقاحات. ويتيح التكيف مع المستنبت المعلق سهولة التوسع وتبسيط عملية الحصاد، مما يجعلها أكثر ملاءمة للمعالجة الحيوية على نطاق تجاري. يدعم خط خلايا HEK293 المتكيف مع نظام التعليق أنظمة إنتاج فيروسية مختلفة، بما في ذلك الفيروسات الغدية والفيروسات اللمفاوية والفيروسات المرتبطة بالغدة (AAV)، والتي تعتبر محورية في التطبيقات العلاجية والأبحاث.

وبشكل عام، يُعد خط الخلايا المكيّفة المعلق HEK293 أداة حاسمة في مجالات البيولوجيا الجزيئية والمعالجة الحيوية، حيث يوفر منصة متعددة الاستخدامات لإنتاج مختلف الجزيئات النشطة بيولوجيًا. كما أن سهولة التلاعب الجيني به وقدرته على إنتاج بروتينات مطوية بشكل صحيح ومعدلة بعد الترجمة وفقًا لأنماط الخلايا البشرية تجعله موردًا لا غنى عنه في العديد من الإعدادات العلاجية والبحثية المتقدمة.

الأنسجة
الكلى
التطبيقات
مضيف نقل العدوى

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
التعليق
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1: This suspension-adapted HEK293 cell line contains adenovirus 5-derived E1 sequences from the parental HEK293 line, supporting high proliferative and protein expression capacity. The modification is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
مستديرة
مُسبِّب للأورام
في الفئران العارية

04المعرّفات

المرجع
معلق HEK293 المعدل (كتالوج سيتيون رقم 300686)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0045

05التعبير والقابلية للإصابة

المستقبلات المُعبَّر عنها
فيترونكتين
التعبير البروتيني
CEA سلبي، p53 إيجابي
قابلية الإصابة بالفيروس
متحوِّل مع الحمض النووي الغدي 5 DNA الغدي 5 DNA الغدي 5

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
بانسيرين 293S (بانبيوتيك، ألمانيا)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
لا حاجة للمكملات الغذائية
كاشف التفكك
غير مطلوب
إعادة الاستنبات
حافظ على خلايا التعليق عند كثافة خلوية تتراوح بين 5 × 105 و 2-3 × 106 خلية/مل في قوارير زراعة الخلايا Eppendorf على هزاز داخل حاضنة عند 37 درجة مئوية/5٪ ثاني أكسيد الكربون. قم بإعادة الزراعة بمجرد وصول كثافة الخلايا إلى 2-3 × 106 خلية/مل. قم بإزالة الخلايا بعناية لتجنب التكتل. بمجرد الوصول إلى كثافة خلوية تبلغ 1-2 × 106 خلية/مل، اجمع الخلايا عن طريق الطرد المركزي عند 200 × g لمدة 5 دقائق وتخلص من الطبقة العائمة. خفف في حجم مناسب من وسط استزراع طازج ومسخن مسبقًا وعد الخلايا للحصول على معلومات عن قابلية الخلايا للحياة وعددها. اجمع الخلايا عن طريق الطرد المركزي بسرعة 200xg لمدة 5 دقائق وتخلص من الطبقة العائمة. أعد تعليق الخلايا في حجم مناسب من وسط التجميد وعدها مرة أخرى. يجب أن تكون قابلية الخلايا للحياة >>80٪، ويوصى بكثافة خلوية تبلغ 5-10 ملايين خلية/مل. انقل الخلايا بواسطة ماصة إلى أنابيب تجميد مسبقة التسمية. استخدم إما حاوية تجميد CoolCell أو مجمد بمعدل تحكم لضمان معدل تبريد يبلغ 1 درجة مئوية/دقيقة.
كثافة البذر
5 × 105 خلية/مل
التعافي بعد ذوبان الجليد
ابدأ الزراعة بكثافة 5 × 105 خلية/مل وحافظ على تركيز الخلايا عند 2-3 × 106 خلية/مل لتحقيق النمو الأمثل. قم بالتحضين عند 37 درجة مئوية/5٪ ثاني أكسيد الكربون على هزاز خلايا بسرعة 100-150 دورة في الدقيقة.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل + 10% DMSO للحصول على صلاحية كافية بعد ذوبان الجليد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
الجنين