Pereiti prie turinio
HEK293 suspension-adapted
Audinys
Inkstai

Dokumentai

HEK293 suspension-adapted

Cell line · Prekės numeris 300686

The HEK293 suspension-adapted cell line is a variant of the human embryonic kidney 293 (HEK293) cells that has been modified to grow in suspension culture...

€500.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
1

01Bendra informacija

Aprašymas

HEK293 suspensijai pritaikyta ląstelių linija yra žmogaus embrioninio inksto 293 (HEK293) ląstelių atmaina, kuri buvo modifikuota taip, kad augtų suspensijos, o ne adhezinėje kultūroje. Šis pritaikymas yra svarbus pramoninėms reikmėms, kai reikia gaminti didelio masto baltymus. Ląstelės išlaiko daugelį originalios HEK293 linijos savybių, įskaitant didelį pereinamosios transfekcijos veiksmingumą ir gebėjimą po transliacijos modifikuoti išreiškiamus baltymus panašiai kaip gimtosios žmogaus ląstelės.

Šios ląstelės ypač vertinamos biotechnologijų ir farmacijos pramonėje gaminant rekombinantinius baltymus ir virusus genų terapijai ir vakcinų kūrimui. Pritaikymas suspensijos kultūroms leidžia lengviau išplėsti ir supaprastina derliaus nuėmimo procesą, todėl yra tinkamesnis komerciniam biotechnologiniam apdorojimui. HEK293 suspensijai pritaikyta ląstelių linija palaiko įvairias virusų gamybos sistemas, įskaitant adenovirusus, lentivirusus ir adenoasocijuotuosius virusus (AAV), kurie yra labai svarbūs gydymui ir moksliniams tyrimams.

Apskritai HEK293 suspensijos adaptuota ląstelių linija yra labai svarbi priemonė molekulinės biologijos ir biologinio perdirbimo srityse, suteikianti universalią platformą įvairioms biologiškai aktyvioms molekulėms gaminti. Dėl lengvo genetinio manipuliavimo ir gebėjimo gaminti baltymus, kurie yra teisingai sulankstyti ir posttransliaciniu būdu modifikuoti pagal žmogaus ląstelių modelius, ji yra nepakeičiamas šaltinis daugelyje pažangių terapijos ir mokslinių tyrimų sričių.

Audinys
Inkstai
Paraiškos
Transfekcijos šeimininkas

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Pakaba
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This suspension-adapted HEK293 cell line contains adenovirus 5-derived E1 sequences from the parental HEK293 line, supporting high proliferative and protein expression capacity. The modification is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Apvalus
Tumorogeninis
Su nuogomis pelėmis

04Identifikatoriai

Nuoroda
HEK293 suspensija adaptuota (Cytion katalogo numeris 300686)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_0045

05Išraiška ir jautrumas

Išreikšti receptoriai
Vitronektinas
Baltojų baltymų ekspresija
CEA neigiamas, p53 teigiamas
Jautrumas virusams
Transformuota su adenoviruso 5 DNR adenoviruso 5 DNR

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
Panserin 293S (PanBiotech, Vokietija)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildų nereikia
Disociacijos reagentas
Nereikalaujama
Subkultūrinis auginimas
Suspensijos ląsteles išlaikykite 5 x 105–2–3 x 106 ląstelių/ml tankiu Eppendorf ląstelių kultūros kolbose, esančiose inkubatoriuje 37 °C temperatūroje ir 5 % CO2 koncentracijoje. Kai ląstelių tankis pasiekia 2–3 x 106 ląstelių/ml, atlikite subkultūrą. Atsargiai atskirkite ląsteles, kad nesusidarytų sankaupų. Kai ląstelių tankis pasiekia 1–2 x 106 ląstelių/ml, surinkite ląsteles centrifuguojant 200xg 5 min. ir išmeskite supernatanto likučius. Praskieskite tinkamu kiekiu šviežio, iš anksto pašildyto kultūrinio terpės ir suskaičiuokite ląsteles, kad gautumėte informaciją apie ląstelių gyvybingumą ir skaičių. Surinkite ląsteles centrifuguojant 200xg greičiu 5 minutes ir išmeskite supernatanto likučius. Pakartotinai suspenduokite ląsteles tinkamu kiekiu šaldymo terpės ir dar kartą suskaičiuokite. Ląstelių gyvybingumas turėtų būti >>80 %, rekomenduojamas ląstelių tankis – 5–10 milijonų ląstelių/ml. Pipete perkelkite ląsteles į iš anksto paženklintas krioviales. Naudokite „CoolCell“ šaldymo indą arba kontroliuojamo greičio šaldiklį, kad užtikrintumėte 1 °C/min. aušinimo greitį.
Sėjos tankis
5 x 105 ląstelių/ml
Atkūrimas po atšilimo
Inicijuokite kultūras, kurių tankis yra 5 x 105 ląstelių/ml, ir palaikykite ląstelių koncentraciją iki 2-3 x 106 ląstelių/ml, kad augimas būtų optimalus. Inkubuokite 37 °C/5 % CO2 temperatūroje ląstelių maišyklėje 100-150 aps/min greičiu.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
Vaisius