HEK293 ląstelės

HEK293 ląstelių linija - nemortizuotų epitelio ląstelių linija, kurią XX a. aštuntajame dešimtmetyje iš žmogaus embrioninių inkstų ląstelių išvedė Utrechto universiteto mokslininkas Alexas van der Ebas - dėl savo nepaprasto universalumo ir paprastų genetinių manipuliacijų tapo pagrindiniu eksperimentiniu modeliu molekulinėje biologijoje ir biotechnologijose.

Transformuojant HEK293 ląstelių liniją, į ląstelės genomą buvo integruotas specifinis adenoviruso 5 DNR segmentas, kuriame buvo įterpti adenoviruso E1A ir E1B genai. Adenovirusinės DNR modifikacija leido ląstelių linijoms efektyviai įsisavinti svetimą DNR, o tai vadinama dideliu transfekcijos efektyvumu. Virusinės DNR integravimas į HEK293 ląstelių genomą lėmė ląstelių nemortalizaciją ir gerokai padidino šių ląstelių naudingumą biotechnologijose, nes palengvino stabilų egzogeninės DNR inkorporavimą ir raišką - šis procesas vadinamas stabilia transfekcija. Ši savybė leidžia ląstelėse nuolat turėti ir veikti svetimus genus, todėl HEK293 tampa neįkainojama genetinių tyrimų ir biotechnologijų priemone.

Todėl HEK293 ląstelės tapo pagrindiniu biotechnologijos šaltiniu rekombinantiniams baltymams, įskaitant gyvybiškai svarbius gydomuosius baltymus, gaminti ir yra patikimos ląstelės šeimininkės virusiniams vektoriams, ypač adenovirusiniams ir lentivirusiniams vektoriams, kurti. HEK 293 ląstelės yra labai svarbios farmacijos pramonėje atliekant didelio našumo atrankinius tyrimus, gaminant genų terapijas, skirtas konkretiems genams, susijusiems su pavienių genų sutrikimais, ir atliekant adenovirusinės infekcijos tyrimus.

Pramoninėje biotechnologijoje žmogaus ląstelių linija HEK 293 naudojama rekombinantinių fermentų gamybai, virusinių vektorių, pavyzdžiui, adenovirusinių vektorių, gamybai, baltymų gamybai ir biojutiklių kūrimui. Toksikologiniams tyrimams HEK ląstelių linija naudinga vertinant cheminių medžiagų poveikį ląstelių biologijai, įskaitant poveikį tipiškoms inkstų ląstelėms ir genų terapijos galimybes. Nemirtingos ląstelių linijos HEK293 gebėjimas efektyviai gaminti vietinius baltymus pabrėžia jos svarbų vaidmenį medicininiuose tyrimuose, įskaitant vėžio tyrimus ir genų terapijos pagrindus.

HEK293 ląstelės yra unikali ląstelių biologijos ir dominančių baltymų tyrimo platforma, pranokstanti kitas ląstelių linijas savo universalumu ir naudingumu tiek moksliniams tyrimams, tiek pramoniniam naudojimui. Palyginimui, HEK293T ląstelės, HEK293 variantas, yra modifikuojamos siekiant padidinti transfekcijos efektyvumą, HEK293F ląstelės yra pritaikytos suspensinėms kultūroms, kad būtų lengviau gaminti didelio masto baltymus, o kitos žinduolių ląstelių linijos, pavyzdžiui, Vero ląstelės, gautos iš beždžionių inkstų audinio, pirmiausia naudojamos vakcinų kūrimui ir virusų tyrimams.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime