HEK293 šūnas

HEK293 šūnu līnija - nemortalizēta epitēlija šūnu līnija, ko 70. gados no cilvēka embrionālajām nieru šūnām ieguva Alekss van der Ebs Utrehtas Universitātē, - ir kļuvusi par galveno eksperimentālo modeli molekulārajā bioloģijā un biotehnoloģijā, pateicoties tās ievērojamajai daudzpusībai un ģenētisko manipulāciju vienkāršībai.

HEK293 šūnu līnijas transformācija ietvēra īpaša segmenta integrēšanu no Adenovīrusa 5 DNS, iekļaujot adenovīrusa E1A un E1B gēnus šūnas genomā. Adenovīrusa DNS modifikācija ļāva šūnu līnijām efektīvi uzņemt svešu DNS, kas ir pazīstama kā augsta transfekcijas efektivitāte. Vīrusu DNS integrēšana HEK293 šūnu genomā izraisīja šūnu imortalizāciju un ievērojami uzlaboja šo šūnu izmantojamību biotehnoloģiskos lietojumos, veicinot stabilu eksogēnās DNS inkorporāciju un ekspresiju - procesu, ko dēvē par stabilu transfekciju. Šī spēja ļauj šūnās pastāvīgi uzturēt un darboties svešzemju gēniem, padarot HEK293 par nenovērtējamu līdzekli ģenētiskajiem pētījumiem un biotehnoloģijai.

Rezultātā HEK293 šūnas ir kļuvušas par biotehnoloģijas pamatresursiem rekombinantu proteīnu, tostarp svarīgu terapeitisko proteīnu, ražošanai un kalpo kā stabilas saimnieka šūnas vīrusu vektoru, jo īpaši adenovīrusu un lentivīrusu vektoru, ražošanai. HEK 293 šūnas ir ļoti svarīgas farmācijas rūpniecībā, veicot augstas veiktspējas skrīninga testus, gēnu terapijas, kas vērstas uz specifiskiem gēniem, kuri saistīti ar atsevišķu gēnu traucējumiem, un adenovīrusu infekcijas pētījumus.

Rūpnieciskajā biotehnoloģijā cilvēka šūnu līnijas HEK 293 lietderība attiecas arī uz rekombinantu enzīmu ražošanu, vīrusu vektoru, piemēram, adenovīrusu vektoru, ražošanu, proteīnu ražošanu un biosensoru izstrādi. Toksikoloģijas pētījumos HEK šūnu līniju izmanto, lai novērtētu ķīmisko vielu ietekmi uz šūnu bioloģiju, tostarp ietekmi uz tipiskām nieru šūnām un gēnu terapijas potenciālu. Nemirstīgās šūnu līnijas HEK293 spēja efektīvi ražot dabiskos proteīnus uzsver tās būtisko lomu medicīnas pētījumos, tostarp vēža pētījumos un gēnu terapijas pamatu izpētē.

HEK293 šūnas piedāvā unikālu platformu šūnu bioloģijas un interesējošo proteīnu pētniecībai, pārspējot citas šūnu līnijas ar savu daudzpusību un lietderību gan pētniecībā, gan rūpniecībā. Salīdzinājumam, HEK293T šūnas, HEK293 variants, ir modificētas, lai uzlabotu transfekcijas efektivitāti, HEK293F šūnas ir pielāgotas suspensijas kultūrām, lai atvieglotu liela apjoma proteīnu ražošanu, un citas zīdītāju šūnu līnijas, piemēram, Vero šūnas, kas iegūtas no pērtiķu nieru audiem, galvenokārt izmanto vakcīnu izstrādē un vīrusu pētījumos.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu