HEK293 rakud

HEK293 rakuliin, mis on inimese embrüonaalsetest neerurakkudest 1970ndatel aastatel Alex van der Eb'i poolt Utrechti ülikoolis saadud immortaliseeritud epiteelirakuliin, on tänu oma märkimisväärsele mitmekülgsusele ja geneetilise manipuleeritavuse lihtsusele muutunud molekulaarbioloogia ja biotehnoloogiliste rakenduste võtmetähtsusega katsemudeliks.

HEK293 rakuliini transformatsioon hõlmas Adenoviiruse 5 DNA spetsiifilise segmendi integreerimist, millega adenoviiruse E1A ja E1B geenid integreeriti raku genoomi. Adenoviiruse DNA muutmine võimaldas rakuliinidel tõhusalt vastu võtta võõrast DNAd, mida nimetatakse suureks transfektsioonitõhususeks. Viirusliku DNA integreerimine HEK293 rakkude genoomi tõi kaasa rakkude immortaliseerimise ja suurendas oluliselt nende rakkude kasutatavust biotehnoloogilistes rakendustes, hõlbustades eksogeense DNA stabiilset inkorporeerimist ja ekspressiooni, mida nimetatakse stabiilseks transfektsiooniks. See võime võimaldab võõraste geenide püsivat olemasolu ja toimimist rakkudes, muutes HEK293 hindamatuks vahendiks geneetilistes uuringutes ja biotehnoloogias.

Selle tulemusena on HEK293 rakud muutunud biotehnoloogias põhiliseks ressursiks rekombinantsete valkude, sealhulgas elutähtsate terapeutiliste valkude tootmisel ning nad on stabiilse peremeesrakuna viirusvektorite, eelkõige adenoviirus- ja lentiviirusvektorite loomisel. HEK 293 rakud on farmaatsiatööstuses keskse tähtsusega kõrge läbilaskevõimega sõeluuringute tegemiseks, üksikute geenihäiretega seotud spetsiifilistele geenidele suunatud geeniteraapiate valmistamiseks ja adenoviirusinfektsiooni uuringuteks.

Tööstuslikus biotehnoloogias ulatub inimese rakuliini HEK293 kasutatavus rekombinantse ensüümi tootmiseks, viirusvektorite, näiteks adenoviirusvektorite tootmiseks, valkude tootmiseks ja biosensorite väljatöötamiseks. Toksikoloogiauuringud saavad kasu HEK rakuliini kasutamisest kemikaalide mõju hindamisel rakubioloogiale, sealhulgas mõju tüüpilistele neerurakkudele ja geeniteraapia potentsiaali hindamisel. Immortaalse rakuliini HEK293 võime toota tõhusalt natiivseid valke rõhutab nende olulist rolli meditsiinilistes uuringutes, sealhulgas vähiuuringutes ja geeniteraapia aluste uurimisel.

HEK293 rakud pakuvad ainulaadset platvormi rakubioloogia ja huvipakkuvate valkude uurimiseks, ületades teisi rakuliine mitmekülgsuse ja kasulikkuse poolest nii teadustöös kui ka tööstuslikes rakendustes. Võrdluseks, HEK293T rakud, mis on HEK293 variant, on modifitseeritud transfektsiooni tõhususe suurendamiseks, HEK293F rakud on kohandatud suspensioonikultuuriks, et hõlbustada suuremahulist valkude tootmist, ja teisi imetajate rakuliine, nagu Vero rakud, mis on saadud ahvi neerukoes, kasutatakse peamiselt vaktsiinide arendamiseks ja viiruste uuringutes.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest