Mine otse sisu juurde
HEK293T/17
Kude
Embrüonaalne neer
Sünonüümid
HEK293T/17, HEK-293T/17, HEK 293T/17

Dokumendid

HEK293T/17

Cell line · Toote number 305117

The 293T/17 cell line is an immortalized variant of the HEK293 line, derived from human embryonic kidney cells and extensively utilized in research, parti...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Rakuliin 293T/17 on inimese embrüonaalsetest neerurakkudest saadud HEK293 rakuliini immortaliseeritud variant, mida kasutatakse laialdaselt teadusuuringutes, eelkõige retroviiruslike ja lentiviirusvektorite uurimisel ja tootmisel. Seda rakuliini on modifitseeritud, et see ekspresseeriks SV40 suurt T-antigeeni, mis suurendab selle kasutatavust viirusvektorite tootmisel. SV40 suure T antigeeni ekspressioon on peamine omadus, mis võimaldab neil rakkudel replitseerida SV40 replikatsiooni algupära sisaldavaid plasmiide, suurendades oluliselt plasmiid-DNA saagist transientse transfektsiooni protseduuride puhul. See omadus on eriti kasulik viirusvektorite tootmisel.

293T/17 rakud on olulised selliste viirusvektorite nagu retroviirused ja lentiviirused tootmisel. Nad toodavad tõhusalt viiruslikke osakesi tänu oma võimele amplifitseerida transfekteeritud plasmiide ning toetada viiruse kokkupanekut ja vabanemist. See muudab nad oluliseks vahendiks geeniteraapiauuringutes, kus neid vektoreid kasutatakse geneetilise materjali viimiseks peremeesrakkudesse. Rakkudel on kõrge transfektsioonitõhusus, mis on oluline võõra DNA edukaks sissetoomiseks ja ekspressiooniks vektorite ehitamisel. See kõrge tõhusus võimaldab tõhusalt uurida geenide funktsiooni ja luua rekombinantseid valke.

Rakuliini 293T/17 tugevad omadused muudavad selle asendamatuks nii teaduslikes alusuuringutes kui ka terapeutilistes rakendustes. Seda kasutatakse laialdaselt molekulaarbioloogias ja geenitehnoloogias valkude ekspressiooniks, geenifunktsiooni analüüsiks ja uute geeniteraapiate väljatöötamiseks. Rakuliini tõhusus viirusvektorite tootmisel hõlbustab geneetilise materjali edastamist nõudvaid katseid, mis teeb sellest viroloogia valdkonna nurgakivi. Rakuliinil 293T/17 on jätkuvalt keskne roll geenifunktsiooni mõistmisel ja terapeutiliste sekkumiste väljatöötamisel.

Kude
Embrüonaalne neer
Rakendused
See rakuliin on optimaalne valik transfektsiooni, suure läbilaskevõimega sõeluuringute, toksikoloogia ja vaktsiinide väljatöötamise jaoks.
Sünonüümid
  • HEK293T/17
  • HEK-293T/17
  • HEK 293T/17

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This HEK293T/17 cell line contains SV40, enhancing plasmid replication and packaging efficiency. The insert is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel

04Tunnused

Viide
HEK293T/17 (Cytioni kataloognumber 305117)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1926

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
SV40 T antigeen
Viirused
SV40 (väljendab SV40 T antigeeni)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
Loote