Aller directement au contenu
HEK293T/17
Tissu
Rein embryonnaire
Synonymes
HEK293T/17, HEK-293T/17, HEK 293T/17

Documents

HEK293T/17

Cell line · Référence du produit 305117

The 293T/17 cell line is an immortalized variant of the HEK293 line, derived from human embryonic kidney cells and extensively utilized in research, parti...

€550.00hors taxes et frais de port
En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire 293T/17 est une variante immortalisée de la lignée HEK293, dérivée de cellules rénales embryonnaires humaines et largement utilisée dans la recherche, en particulier dans l'étude et la production de vecteurs rétroviraux et lentiviraux. Cette lignée cellulaire a été modifiée pour exprimer l'antigène SV40 large T, ce qui renforce son utilité dans la production de vecteurs viraux. L'expression de l'antigène SV40 grand T est une caractéristique clé qui permet à ces cellules de répliquer des plasmides contenant l'origine de réplication SV40, ce qui augmente considérablement le rendement de l'ADN plasmidique dans les procédures de transfection transitoire. Cette caractéristique est particulièrement utile pour la production de vecteurs viraux.

les cellules 293T/17 sont essentielles à la production de vecteurs viraux tels que les rétrovirus et les lentivirus. Elles produisent efficacement des particules virales grâce à leur capacité à amplifier les plasmides transfectés et à soutenir l'assemblage et la libération du virus. Cela en fait un outil essentiel dans la recherche sur la thérapie génique, où ces vecteurs sont utilisés pour introduire du matériel génétique dans les cellules hôtes. Les cellules présentent une efficacité de transfection élevée, cruciale pour l'introduction et l'expression réussies de l'ADN étranger lors de la construction du vecteur. Cette efficacité élevée permet d'étudier la fonction des gènes et de générer des protéines recombinantes de manière efficace.

Les capacités robustes de la lignée cellulaire 293T/17 en font un outil précieux pour la recherche scientifique fondamentale et les applications thérapeutiques. Elle est largement utilisée en biologie moléculaire et en génie génétique pour l'expression des protéines, l'analyse de la fonction des gènes et le développement de nouvelles thérapies géniques. L'efficacité de la lignée cellulaire à produire des vecteurs viraux facilite les expériences nécessitant l'apport de matériel génétique, ce qui en fait une pierre angulaire dans le domaine de la virologie. La lignée cellulaire 293T/17 continue de jouer un rôle essentiel dans la compréhension de la fonction des gènes et dans le développement d'interventions thérapeutiques.

Tissu
Rein embryonnaire
Applications
Cette lignée cellulaire est un choix optimal pour la transfection, le criblage à haut débit, la toxicologie et le développement de vaccins.
Synonymes
  • HEK293T/17
  • HEK-293T/17
  • HEK 293T/17

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This HEK293T/17 cell line contains SV40, enhancing plasmid replication and packaging efficiency. The insert is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Épithéliale

04Identifiants

Référence
HEK293T/17 (numéro de catalogue Cytion 305117)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1926

05Expression et sensibilité

Expression des antigènes
Antigène T SV40
Virus
SV40 (exprime l'antigène T SV40)

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
Fœtus