Prejsť na obsah
HEK293T/17
Tkanivo
Embryonálna oblička
Synonymá
HEK293T/17, HEK-293T/17, HEK 293T/17

Dokumenty

HEK293T/17

Cell line · Číslo výrobku 305117

The 293T/17 cell line is an immortalized variant of the HEK293 line, derived from human embryonic kidney cells and extensively utilized in research, parti...

€550.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia 293T/17 je imortalizovaný variant línie HEK293, odvodený z ľudských embryonálnych obličkových buniek a hojne využívaný vo výskume, najmä pri štúdiu a výrobe retrovírusových a lentivírusových vektorov. Táto bunková línia bola modifikovaná tak, aby exprimovala veľký antigén SV40 T, čo zvyšuje jej využiteľnosť pri výrobe vírusových vektorov. Expresia veľkého antigénu SV40 T je kľúčovou vlastnosťou, ktorá umožňuje týmto bunkám replikovať plazmidy obsahujúce pôvod replikácie SV40, čo výrazne zvyšuje výťažok plazmidovej DNA pri postupoch prechodnej transfekcie. Táto vlastnosť je obzvlášť výhodná pri výrobe vírusových vektorov.

bunky 293T/17 sú nevyhnutné pri výrobe vírusových vektorov, ako sú retrovírusy a lentivírusy. Účinne produkujú vírusové častice vďaka svojej schopnosti amplifikovať transfekované plazmidy a podporovať zostavovanie a uvoľňovanie vírusov. To z nich robí dôležitý nástroj vo výskume génovej terapie, kde sa tieto vektory používajú na prenos genetického materiálu do hostiteľských buniek. Bunky vykazujú vysokú účinnosť transfekcie, ktorá je rozhodujúca pre úspešné zavedenie a expresiu cudzej DNA počas konštrukcie vektora. Táto vysoká účinnosť umožňuje efektívne štúdium funkcie génov a tvorbu rekombinantných proteínov.

Robustné schopnosti bunkovej línie 293T/17 ju robia neoceniteľnou pre základný vedecký výskum aj terapeutické aplikácie. Široko sa používa v molekulárnej biológii a genetickom inžinierstve na expresiu proteínov, analýzu funkcie génov a vývoj nových génových terapií. Účinnosť bunkovej línie pri produkcii vírusových vektorov uľahčuje experimenty vyžadujúce dodávku genetického materiálu, čím sa stáva základom v oblasti virológie. Bunková línia 293T/17 naďalej zohráva kľúčovú úlohu pri zlepšovaní nášho chápania funkcie génov a vývoji terapeutických zásahov.

Tkanivo
Embryonálna oblička
Aplikácie
Táto bunková línia je optimálnou voľbou na transfekciu, vysoko výkonný skríning, toxikológiu a vývoj vakcín.
Synonymá
  • HEK293T/17
  • HEK-293T/17
  • HEK 293T/17

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This HEK293T/17 cell line contains SV40, enhancing plasmid replication and packaging efficiency. The insert is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelové

04Identifikátory

Citácia
HEK293T/17 (katalógové číslo Cytion 305117)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1926

05Prejav a náchylnosť

Expresia antigénu
SV40 T antigén
Vírusy
SV40 (exprimuje antigén SV40 T)

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
Plod