Przejdź do treści
HEK293T/17
Chusteczka
Nerka embrionalna
Synonimy
HEK293T/17, HEK-293T/17, HEK 293T/17

Dokumenty

HEK293T/17

Cell line · Numer produktu 305117

The 293T/17 cell line is an immortalized variant of the HEK293 line, derived from human embryonic kidney cells and extensively utilized in research, parti...

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa 293T/17 jest immortalizowanym wariantem linii HEK293, pochodzącej z ludzkich embrionalnych komórek nerkowych i szeroko wykorzystywanej w badaniach, w szczególności w badaniach i produkcji wektorów retrowirusowych i lentiwirusowych. Ta linia komórkowa została zmodyfikowana w celu ekspresji antygenu SV40 large T, zwiększając jej użyteczność w produkcji wektorów wirusowych. Ekspresja antygenu SV40 large T jest kluczową cechą, która umożliwia tym komórkom replikację plazmidów zawierających źródło replikacji SV40, znacznie zwiększając wydajność plazmidowego DNA w procedurach przejściowej transfekcji. Cecha ta jest szczególnie korzystna w przypadku produkcji wektorów wirusowych.

komórki 293T/17 są niezbędne w produkcji wektorów wirusowych, takich jak retrowirusy i lentiwirusy. Efektywnie wytwarzają cząsteczki wirusowe ze względu na ich zdolność do amplifikacji transfekowanych plazmidów i wspomagania montażu i uwalniania wirusa. Czyni je to istotnym narzędziem w badaniach nad terapią genową, gdzie wektory te są wykorzystywane do dostarczania materiału genetycznego do komórek gospodarza. Komórki wykazują wysoką wydajność transfekcji, kluczową dla pomyślnego wprowadzenia i ekspresji obcego DNA podczas budowy wektora. Ta wysoka wydajność umożliwia skuteczne badanie funkcji genów i generowanie rekombinowanych białek.

Solidne możliwości linii komórkowej 293T/17 sprawiają, że jest ona nieoceniona zarówno w podstawowych badaniach naukowych, jak i zastosowaniach terapeutycznych. Jest szeroko stosowana w biologii molekularnej i inżynierii genetycznej do ekspresji białek, analizy funkcji genów i opracowywania nowych terapii genowych. Wydajność linii komórkowej w produkcji wektorów wirusowych ułatwia eksperymenty wymagające dostarczania materiału genetycznego, co czyni ją kamieniem węgielnym w dziedzinie wirusologii. Linia komórkowa 293T/17 nadal odgrywa kluczową rolę w pogłębianiu naszego zrozumienia funkcji genów i opracowywaniu interwencji terapeutycznych.

Chusteczka
Nerka embrionalna
Zastosowania
Ta linia komórkowa jest optymalnym wyborem do transfekcji, wysokowydajnych badań przesiewowych, toksykologii i opracowywania szczepionek.
Synonimy
  • HEK293T/17
  • HEK-293T/17
  • HEK 293T/17

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This HEK293T/17 cell line contains SV40, enhancing plasmid replication and packaging efficiency. The insert is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Nabłonek

04Identyfikatory

Źródło
HEK293T/17 (numer katalogowy Cytion 305117)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1926

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
Antygen SV40 T
Wirusy
SV40 (wyraża antygen SV40 T)

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
Płód