
- Chusteczka
- Nerka embrionalna
- Synonimy
- HEK-293A, HEK293A, HEK 293A, HEK293-A, QBI-HEK 293A, QBI-293A
Dokumenty
HEK293A
Cell line · Numer produktu 305070
Linia komórkowa HEK293A, pochodna komórek ludzkiej embrionalnej nerki 293 (HEK293), stanowi wyspecjalizowane narzędzie w badaniach wirusologicznych i nad terapią genową...
Dostosowanie / Zalecenia
- HEK293ACell line€430.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
Linia komórkowa HEK293A, pochodna ludzkich embrionalnych komórek nerkowych 293 (HEK293), stanowi wyspecjalizowane narzędzie w badaniach wirusologicznych i terapii genowej, w szczególności w produkcji, amplifikacji i miareczkowaniu adenowirusów niekompetentnych replikacyjnie. Komórki te wykazują płaską morfologię, co znacznie pomaga w badaniu mikroskopowym i procesach miareczkowania, ułatwiając liczenie i ocenę cząstek wirusowych.
Kluczową cechą linii komórkowej HEK293A jest stabilna integracja genu adenowirusa E1 z jej genomem. Integracja ta ma kluczowe znaczenie, ponieważ zapewnia niezbędną maszynerię transkrypcyjną do ekspresji białek E1, w szczególności E1a i E1b. Obecność tych białek jest niezbędna do replikacji wektorów adenowirusowych w komórce. Białko E1a działa głównie w celu aktywacji transkrypcji genomu adenowirusa, podczas gdy białka E1b są zaangażowane w replikację wirusa i zakłócenie cyklu komórkowego.
Użyteczność komórek HEK293A wykracza poza zwykłe wspieranie replikacji wirusów. Komórki te ułatwiają wydajną produkcję wysokiej jakości preparatów wirusowych o wysokim mianie, niezbędnych zarówno do badań podstawowych, jak i zastosowań terapeutycznych. Solidna zdolność replikacyjna linii komórkowej i łatwość obsługi umożliwiają badaczom przesiewanie i opracowywanie konstruktów adenowirusowych z niespotykaną dotąd precyzją i wydajnością.
Podsumowując, linia komórkowa HEK293A jest niezbędnym zasobem w dziedzinie wirusologii i terapii genowej. Jej zdolność do stabilnej ekspresji białek E1 i wspierania replikacji adenowirusów czyni ją cennym narzędziem dla naukowców chcących produkować i manipulować wektorami adenowirusowymi. Charakterystyka linii komórkowej pozwala na wydajne generowanie wektorów wirusowych, co ma kluczowe znaczenie dla postępu badań i potencjalnych interwencji terapeutycznych.
- Chusteczka
- Nerka embrionalna
- Synonimy
- HEK-293A
- HEK293A
- HEK 293A
- HEK293-A
- QBI-HEK 293A
- QBI-293A
02Klasyfikacja
- Organizm
- Człowiek
- Seks
- Kobieta
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Status GMO
- GMO-S1
- Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
- GMO-S1: This HEK293A cell line contains SV40 from Simian Virus 40, supporting enhanced transfection performance and proliferation. The construct is stably integrated into embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Nabłonek
04Identyfikatory
- Źródło
- HEK293A (numer katalogowy Cytion 305070)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6910
05Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (numer artykułu Cytion 820100a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS i 1% NEAA
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Odnawianie płynów
- 2 do 3 razy w tygodniu
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
07Darczyńca
- Wiek dawcy
- Płód
08Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak





.jpg)
