HEK293A

La línea celular HEK293A, derivada de las células renales embrionarias humanas 293 (HEK293), constituye una herramienta especializada en la investigación virológica y de terapia génica, particularmente en la producción, amplificación y titulación de adenovirus incapaces de replicarse. Estas células presentan una morfología plana, lo que facilita considerablemente los procesos de examen microscópico y titulación, simplificando el conteo y la evaluación de las partículas virales.

Una característica fundamental de la línea celular HEK293A es la integración estable del gen E1 del adenovirus en su genoma. Esta integración es crucial, ya que proporciona la maquinaria transcripcional necesaria para la expresión de las proteínas E1, específicamente E1a y E1b. La presencia de estas proteínas es esencial para la replicación de los vectores adenovirales en la célula. La proteína E1a tiene como función principal activar la transcripción del genoma del adenovirus, mientras que las proteínas E1b participan en la replicación viral y en la alteración del ciclo celular.

La utilidad de las células HEK293A va más allá de simplemente facilitar la replicación viral. Estas células permiten la producción eficiente de preparaciones virales de alto título y alta calidad, esenciales tanto para la investigación básica como para aplicaciones terapéuticas. La sólida capacidad de replicación de la línea celular y su facilidad de manejo permiten a los investigadores seleccionar y desarrollar constructos adenovirales con una precisión y eficiencia sin precedentes.

En resumen, la línea celular HEK293A es un recurso indispensable en el campo de la virología y la terapia génica. Su capacidad para expresar de manera estable las proteínas E1 y facilitar la replicación adenoviral la convierte en una herramienta valiosa para los investigadores que buscan producir y manipular vectores adenovirales. Las características de la línea celular permiten la generación eficiente de vectores virales, lo cual es crucial para el avance de la investigación y las posibles intervenciones terapéuticas.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.