Премини към съдържанието
HEK293A
Тъкан
Ембрионален бъбрек
Синоними
HEK-293A, HEK293A, HEK 293A, HEK293-A, QBI-HEK 293A, QBI-293A

Документи

HEK293A

Cell line · Номер на продукта 305070

Клетъчната линия HEK293A, произхождаща от човешките ембрионални бъбречни клетки 293 (HEK293), представлява специализиран инструмент в изследванията в областта на вирусологията и генната терапия...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия HEK293A, производна на клетките на човешкия ембрионален бъбрек 293 (HEK293), представлява специализиран инструмент за вирусологични изследвания и генна терапия, по-специално за производство, усилване и титруване на аденовируси, които не са способни на репликация. Тези клетки притежават плоска морфология, която значително подпомага микроскопското изследване и процесите на титруване, като улеснява преброяването и оценката на вирусните частици.

Основна характеристика на клетъчната линия HEK293A е стабилното интегриране на аденовирусния ген Е1 в нейния геном. Тази интеграция е от решаващо значение, тъй като осигурява необходимия транскрипционен механизъм за експресия на протеините Е1, по-специално Е1а и Е1b. Наличието на тези протеини е от съществено значение за репликацията на аденовирусните вектори в клетката. Протеинът E1a функционира основно за активиране на транскрипцията на аденовирусния геном, докато протеините E1b участват във вирусната репликация и нарушаването на клетъчния цикъл.

Полезността на клетките HEK293A се простира отвъд простото поддържане на вирусната репликация. Тези клетки улесняват ефективното производство на високо титърни, висококачествени вирусни препарати, които са от съществено значение както за фундаментални изследвания, така и за терапевтични приложения. Силният капацитет за репликация на клетъчната линия и лесната работа с нея позволяват на изследователите да провеждат скрининг и да разработват аденовирусни конструкции с безпрецедентна прецизност и ефективност.

В обобщение, клетъчната линия HEK293A е незаменим ресурс в областта на вирусологията и генната терапия. Способността ѝ да експресира стабилно протеини Е1 и да поддържа аденовирусна репликация я прави ценен инструмент за изследователите, които искат да произвеждат и манипулират аденовирусни вектори. Характеристиките на клетъчната линия позволяват ефективно генериране на вирусни вектори, което е от решаващо значение за напредъка на научните изследвания и потенциалните терапевтични интервенции.

Тъкан
Ембрионален бъбрек
Синоними
  • HEK-293A
  • HEK293A
  • HEK 293A
  • HEK293-A
  • QBI-HEK 293A
  • QBI-293A

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
GMO-S1
Подробности относно статуса на ГМО
GMO-S1: This HEK293A cell line contains SV40 from Simian Virus 40, supporting enhanced transfection performance and proliferation. The construct is stably integrated into embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Епителиален

04Идентификатори

Източник
HEK293A (каталожен номер 305070 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_6910

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (номер на статията в Cytion 820100a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS и 1% NEAA
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Възраст на донора
Плод