HEK293A

La lignée cellulaire HEK293A, dérivée des cellules de rein embryonnaire humain 293 (HEK293), représente un outil spécialisé dans la recherche virologique et la thérapie génique, en particulier dans la production, l'amplification et le titrage d'adénovirus incompétents pour la réplication. Ces cellules présentent une morphologie plate qui facilite considérablement l'examen microscopique et les processus de titrage, ce qui simplifie le comptage et l'évaluation des particules virales.

Une caractéristique essentielle de la lignée cellulaire HEK293A est l'intégration stable du gène E1 de l'adénovirus dans son génome. Cette intégration est cruciale car elle fournit la machinerie transcriptionnelle nécessaire à l'expression des protéines E1, en particulier E1a et E1b. La présence de ces protéines est essentielle pour la réplication des vecteurs adénoviraux dans la cellule. La protéine E1a a pour fonction principale d'activer la transcription du génome de l'adénovirus, tandis que les protéines E1b sont impliquées dans la réplication virale et la perturbation du cycle cellulaire.

L'utilité des cellules HEK293A va au-delà du simple soutien à la réplication virale. Ces cellules facilitent la production efficace de préparations virales à titre élevé et de haute qualité, essentielles à la fois pour la recherche fondamentale et les applications thérapeutiques. La capacité de réplication robuste de la lignée cellulaire et sa facilité de manipulation permettent aux chercheurs de cribler et de développer des constructions adénovirales avec une précision et une efficacité sans précédent.

En résumé, la lignée cellulaire HEK293A est une ressource indispensable dans le domaine de la virologie et de la thérapie génique. Sa capacité à exprimer de manière stable les protéines E1 et à supporter la réplication adénovirale en fait un outil précieux pour les chercheurs qui souhaitent produire et manipuler des vecteurs adénoviraux. Les caractéristiques de la lignée cellulaire permettent de générer efficacement des vecteurs viraux, ce qui est essentiel pour faire avancer la recherche et les interventions thérapeutiques potentielles.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie